實時熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)憑借其能夠在 PCR 擴增過程中實時監測熒光信號變化,從而實現對目的基因精細定量的特點,在多個領域都有較廣且重要的應用。qPCR的高靈敏度使其能對微量生物樣本(如血液、毛發、唾液、精斑等)進行檢測,在個體識別、親子鑒定等方面發揮重要作用。個體識別:通過擴增樣本中特異性的短串聯重復序列(STR)并定量分析,與已知樣本比對,實現個體的精細識別,廣泛應用于刑事案件偵破和災難事故中的身份確認。親子鑒定:基于親代與子代基因序列的遺傳規律,通過定量分析特定基因標記的匹配程度,確定親子關系,結果準確性可達99.99%以上。光學系統可以確保高靈敏度和高特異性,適用于各種基因表達分析、病原體檢測和 SNP 分型等應用。定性基因擴增儀PCR儀廠家供應
性能指標溫度控制準確性:指樣品孔溫度與設定溫度的一致性,直接關系到實驗的成敗,一般要求溫度準確性在±0.1℃-±0.2℃之間。均勻性:指樣品孔間的溫度差異,關系到不同樣品孔進行反應結果的一致性,良好的溫度均勻性可使實驗結果更具重復性,通常溫度均勻性應在±0.2℃-±0.5℃范圍內。升降溫速度:更快的升降溫速度可以縮短反應時間,提高實驗效率,同時減少非特異性結合的機會,一般PCR儀的升降溫速率在3℃/s-6℃/s左右。模塊規格:常見的有96孔、48孔、32孔等,可根據實驗需求選擇合適的模塊規格。此外,一些PCR儀還兼容0.2ml、0.5ml管以及96標準微孔板等不同類型的反應容器。程序設置:包括可記憶程序數目、比較大程序段數、比較大溫階步數、比較大循環次數、比較大保溫時間等。豐富的程序設置功能可以滿足不同實驗的需求。定量基因擴增儀PCR儀要多少錢柏恒RePure系列PCR儀在擴增效果方面表現優異,具有高靈敏度和穩定性,能夠實現快速、高效的DNA擴增。
反應體系配制與加樣體系配制:按比例在離心管中混合各組分(先加非模板試劑,***加模板,避免污染),輕輕混勻(勿劇烈震蕩),短暫離心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液體沉底。示例(20μL 體系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 無菌水 6.4μL(探針法需額外加探針)。加樣:將配制好的體系逐一加入 96 孔板的對應孔中,避免產生氣泡(若有氣泡,用吸頭刺破)。加樣后用封板膜密封(確保無褶皺、無漏液),短暫離心(500-1000 rpm,30 秒),使液體聚集在孔底,避免掛壁。
農業與種業:精細育種與作物保護:1. 轉基因作物檢測場景:檢測作物中是否含外源基因(如抗蟲 Bt 基因、抗除草劑 EPSPS 基因),用于監管合規性篩查(如進出口農產品檢測)。技術價值:通過 PCR 擴增轉基因載體的啟動子(如 CaMV 35S)、終止子(如 NOS)或目的基因,區分轉基因與非轉基因品種。設備需求:便攜式 PCR 儀(田間快速檢測)+ 常規實驗室高通量機型(批量樣本篩查)。2. 作物品種鑒定與抗病育種場景:種子純度檢測(如水稻品種 SSR 標記分析)、抗病基因篩選(如小麥抗銹病基因 Lr34 的分子標記輔助育種)。技術價值:利用 PCR 擴增特異性分子標記(如 SSR、SNP),快速鑒定品種真實性或篩選抗病株系,替代傳統表型鑒定的長周期(如育種周期從 5 年縮短至 2 年)。RePure-(D)B通過梯度功能優化PCR反應條件,可以將實驗過程簡化,縮短實驗時間,提高實驗效率。
篩選轉基因作物:在食品生產中,許多原料來自轉基因作物。PCR 儀可對食品中的植物成分進行檢測,通過擴增特定的轉基因元件,如啟動子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉基因成分。例如,檢測轉基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉基因產品,為消費者提供知情權和選擇權。監控轉基因食品標識:PCR 技術能夠準確檢測食品中的微量轉基因成分,有助于監管部門對市場上的食品進行嚴格監控,確保轉基因食品按照相關法規進行正確標識,防止誤導消費者。RePure-(D)B梯度功能的應用為實驗提供了更多可能性和選擇,使實驗設計更加靈活多樣。南京定量基因擴增儀PCR儀一般多少錢
柏恒RePure系列PCR儀進行PCR擴增,能夠獲得高質量的擴增產物,確保實驗結果的可靠性和準確性。定性基因擴增儀PCR儀廠家供應
放入 PCR 儀:將配置好的反應管放入基因擴增儀 PCR 儀中,按照設定的程序進行擴增反應。設置擴增程序:一般包括預變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預變性步驟通常在 94℃-95℃下進行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結合;延伸溫度通常為 72℃,時間根據擴增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進行 5-10 分鐘,確保所有擴增產物延伸完整。循環次數一般為 30-40 次。定性基因擴增儀PCR儀廠家供應