抗體IgG可通過其Fc段與表面具有相應受體的細胞結合,產生不同的生物學作用。調理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細胞、巨噬細胞表面相應的Fc受體結合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用。例如,細菌特異性的IgG抗體可通過其Fab段與相應的細菌抗原結合后,以其Fc段與巨噬細胞或中性粒細胞表面相應的Fc受體結合,通過IgG的Fab段和Fc段的“橋聯”作用,促進吞噬細胞對細菌的吞噬。抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有殺傷活性的細胞(如NK細胞)通過其表面的Fc受體識別包被于靶細胞表面抗原(如病毒感染細胞或腫瘤細胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細胞。NK細胞是介導ADCC的主要細胞。抗體與靶細胞上的抗原結合是特異性的,而表達Fc受體細胞的殺傷作用是非特異性的 。多克隆抗體可以用于檢測特定蛋白質在不同組織和細胞中的表達情況。山東自身抗體
多克隆單克隆:天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時啟動多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發生交叉反應,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍。山東自身抗體多克隆抗體的制備過程相對復雜,需要較長時間和資源。
抗體規律:凡能產生抗體的高等動物(包括人類),當注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進行免疫時都有著相同產生抗體的規律,即存在初次免疫應答(primary immune response)和再次免疫應答(secondary immune response)。初次免疫應答是指機體初次接觸某種抗原物質引起特異性抗體產生的過程。其特點是潛伏期長(一周以上),產生的抗體滴度(效價)低、維持的時間短,產生的抗體以IgM為主;再次免疫應答是指機體以后再次接觸同樣的抗原后所產生的抗體應答過程。其特點是產生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時問長,產生的抗體以IgG為主。非胸腺依賴性抗原(TI抗原)引起的體液免疫由于不產生記憶細胞,因此只有初次免疫應答,沒有再次免疫應答。
抗體主要功能:啟動補體產生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應抗原結合后,可因構象改變而使其CH2和CH3結構域內的補體結合點暴露,從而通過經典途徑啟動補體系統,產生多種效應功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動補體系統的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動補體,但在形成聚合物后可通過旁路途徑啟動補體系統。通常情況下,lgD不能啟動補體。調理吞噬和ADCC:IgG可通過其Fc段與表面具有相應受體的細胞結合,產生不同的生物學作用。單克隆抗體可以用于篩選藥物候選物。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內誘生法和體外培養法。(1)體內誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預處理。1-2周后,腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,并產生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養法將雜交瘤細胞置于培養瓶中進行培養。在培養過程中,雜交瘤細胞產生并分泌單克隆抗體,收集培養上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產生的抗體量有限。各種新型培養技術和裝置不斷出現,極大提高了抗體的生產量。單克隆抗體是通過基因工程技術制備的,具有高度特異性和穩定性,被普遍應用于調理和診斷領域。深圳免疫抗體補給公司
單克隆抗體可以用于研究疾病的發病機制。山東自身抗體
免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產生致敏B淋巴細胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫部位,刺激相應B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細胞。細胞融合采用二氧化碳氣體處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發生融合,形成雜交瘤細胞。山東自身抗體