抗體重鏈和輕鏈:輕鏈分子量約為25 000,由214個氨基酸殘基構成。輕鏈可分為兩種,分別為kappa(κ)鏈和lambda(λ)鏈。據此,可將Ig分為兩型(type),即κ型和λ型。一個Ig分子上兩條輕鏈的型別總是相同的。不同類Ig既存在κ型,也存在λ型。同一個體內可同時存在κ型和λ型的Ig分子,不同種屬生物體內兩型輕鏈的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ約為2:1,而在小鼠則為20:1。Ig的κ與λ的比例異常可以反映免疫系統的異常。根據λ鏈恒定區個別氨基酸的差異,又可將λ鏈分為λ1、λ2、λ3和λ4四個亞型(subtype)。單克隆抗體的研究已經取得了明顯的進展。湖北單克隆抗體研發制造
抗體基本結構:經x線晶體衍射結構分析發現,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結構,稱為Ig單體,是構成抗體的基本單位。天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個氨基酸殘基組成。重鏈恒定區的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。北京IgM抗體供應商多克隆抗體的結合位點通常存在多種結合位點,可以有不同的結合特異性。
多克隆單克隆:天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時啟動多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發生交叉反應,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍。
抗體介導I型超敏反應。IgE為親細胞抗體,可通過其Fc段與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的IgE高親和力Fc受體結合,使其致敏。當相同的變應原再次進入機體時,可以直接與致敏靶細胞表面的特異性IgE結合,促使這些細胞合成和釋放生物活性物質,引起I型超敏反應。在人類,lgG是能夠通過胎盤的抗體。胎盤母體一側的滋養層細胞可表達一種特異性的IgG輸送蛋白,稱為FcRn。IgG可選擇性地與FcRn結合,從而轉移到滋養層細胞內,并主動進入胎兒的血循環中。IgG穿過胎盤的作用在于這是一種重要的自然被動免疫機制,對于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,sigA可通過呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中發揮重要的免疫防御作用。抗體對于病毒傳染的控制尤為重要,如針對HIV的中和抗體研究具有重要意義。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內誘生法和體外培養法。(1)體內誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預處理。1-2周后,腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,并產生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養法將雜交瘤細胞置于培養瓶中進行培養。在培養過程中,雜交瘤細胞產生并分泌單克隆抗體,收集培養上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產生的抗體量有限。各種新型培養技術和裝置不斷出現,極大提高了抗體的生產量。單克隆抗體的研究有助于了解免疫系統的功能。浙江單克隆抗體基因
多克隆抗體具有更普遍的抗原特異性,可以同時識別多個不同的抗原分子。湖北單克隆抗體研發制造
1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發現抗體主要存在于γ區,因此抗體又被稱為γ球蛋白。隨后,經1968年和1972年的世界衛生組織和國際免疫學會聯合會討論決定,將具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白統一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構成B細胞膜表面的抗原受體。湖北單克隆抗體研發制造