HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長(zhǎng)拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少，幅度太小；可延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短，切片上水分沒有烤干，也會(huì)導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。HE染色，南京英瀚斯，專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司。山東質(zhì)量好的HE染色分析

HE染色原理：易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia)；而對(duì)堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時(shí)，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時(shí)，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴Ｋ哉f染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。安徽病理HE染色哪家好HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實(shí)驗(yàn)方法。

HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明，把這個(gè)過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過度。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱藍(lán)化作用，一般多用自來水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán)。

HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因：（1）組織處理溫度過高、過熱，在石蠟停留的時(shí)間過長(zhǎng)；（2）固定時(shí)間太短，接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策：理論上來說，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過長(zhǎng)時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析。

HE染色組織樣本水化：將浸泡過二甲苯的待測(cè)組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min，使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去，使水可以進(jìn)入組織中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán)：將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，總共清洗３次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液，每個(gè)組織切片滴加100ul，充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化，使細(xì)胞核中結(jié)合過多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色，使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中，讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。云南病理HE染色分析

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HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對(duì)原因：切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水，導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對(duì)策：移去蓋玻片，用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中，待切片重新脫水完全后，用新二甲苯透明，中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體，在使用一定時(shí)間以后，應(yīng)即時(shí)更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對(duì)原因：蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對(duì)策：移去蓋玻片，重新用干凈的蓋玻片封片山東質(zhì)量好的HE染色分析