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湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-14

免疫磁珠技術(shù)(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內(nèi)外研究的一種新的免疫學(xué)技術(shù).隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應(yīng)性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細(xì)胞活性等優(yōu)點(diǎn),因此它能從大量外周血細(xì)胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個(gè)主要偶聯(lián)時(shí)間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價(jià)為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達(dá)77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時(shí)間至少縮短20h.標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售

免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細(xì)胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實(shí)驗(yàn)于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細(xì)胞,利用免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細(xì)胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細(xì)胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細(xì)胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細(xì)胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細(xì)胞,收集到c-kit^+lin-細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)。取2.0x108個(gè)細(xì)胞分成10等份,流式細(xì)胞儀分析c-Kit^+lin^-細(xì)胞純度,計(jì)算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細(xì)胞活力。計(jì)算活細(xì)胞的百分率。細(xì)胞純度和細(xì)胞回收率的計(jì)算:細(xì)胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),分離細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)×100%,細(xì)胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),起始標(biāo)本陽性細(xì)胞總數(shù)×100%。遼寧protein A/G COIP免疫磁珠性能免疫磁珠陰性法富集惡性胸腔積液中腫瘤細(xì)胞方法的建立。

小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的免疫磁珠負(fù)性分選方法,并對分選后所得細(xì)胞進(jìn)行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負(fù)性分選法從小鼠脾臟細(xì)胞中分離CD8+T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測所得細(xì)胞的純度,臺(tái)盼藍(lán)檢測細(xì)胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細(xì)胞儀測定免疫磁珠負(fù)性分選后的小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞純度達(dá)到(91.6±3.6)%,臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細(xì)胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負(fù)性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細(xì)胞,并且不影響分選靶細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能.

抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測分析的價(jià)值。應(yīng)用免疫磁珠分離法純化弓形蟲速殖子的研究。

建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價(jià)值。方法將Eno重組蛋白耦聯(lián)至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗人IgG為二抗,優(yōu)化免疫磁珠法的反應(yīng)條件,考察其精密度和特異性。收集經(jīng)血培養(yǎng)確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細(xì)菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內(nèi)、批間變異系數(shù)(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應(yīng)抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時(shí),診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結(jié)論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。湖南蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起

免疫磁珠技術(shù)檢測外周血中卵巢Cancer細(xì)胞。湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售

應(yīng)用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標(biāo)記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)及生長情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型,并檢測細(xì)胞體外多向分化能力.結(jié)果應(yīng)用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細(xì)胞可獲得乳牙牙髓干細(xì)胞,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理證明看其生長速度慢于牙髓細(xì)胞,細(xì)胞表型分析證實(shí)CD29,CD105高表達(dá),CD34,CD45低表達(dá).礦化誘導(dǎo)和成脂誘導(dǎo)證實(shí)STRO-1+乳牙牙髓細(xì)胞具有干細(xì)胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細(xì)胞的方法.所分離的細(xì)胞具有干細(xì)胞的表型特點(diǎn)及多向分化能力.湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售

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