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上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

來源: 發布時間:2022-02-18
COIP 磁珠緩沖液匯總

細胞裂解液
正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
結合緩沖液binding buffer
用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
洗滌緩沖液Washing buffer
PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
洗脫緩沖液Elution buffer
直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后,收集上清液檢測。

COIP 常見問題及對策


多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應用。上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

常見問題
原因
解決方法
高的背景條帶
蛋白非特異結合到抗體,磁珠或EP管上洗滌次數不夠
對裂解液進行預處理去除非特異蛋白; 在***一次洗滌前, 轉移整個樣品到新的EP管中然后進行離心。
洗滌次數不夠
增加洗滌的時間和次數。
無蛋白條帶
Myc 標簽蛋白沒有表達
確保目的蛋白帶有Flag/HA/Myc 標簽; 制備新鮮的裂解液; 使用恰當的蛋白酶抑制劑。
孵育時間不足
增加孵育時間。
樣品中存在干擾物質
裂解液中存在高濃度的DTT,2-mercaptoetMyc nol或者其他的還原劑;

偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發光成像定量監測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統計學意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統計學意義(均P0.05).結論:偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.吉林anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。

碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯抗體,制備可高效分離細胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進行反應,從而將抗體偶聯于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯接的抗體量及其免疫活性.結果HPPS檢測磁珠平均水力學粒徑為110nm;磁珠表面偶聯52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經磁分離后細胞的流式分析結果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細胞系(KG-1a)細胞,免疫磁珠均勻結合于細胞表面,且不影響細胞的活性.結論成功制備可用于細胞分離且不影響分離后細胞活性的新型免疫磁珠.

微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經干細胞并進行培養,為研究神經干細胞的特性與神經干細胞的培養和移植研究創造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結果分離的神經干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經干細胞群落簡便,有效,可以為神經干細胞的細胞培養和移植提供細胞來源.利用BEENBIO免疫磁珠技術檢測大腸*細胞。

核酸提取磁珠通過對磁珠進行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實現對核酸的高通量、自動化提取,這一技術產生于20世紀80年代,已經有了成熟的試劑盒并形成為產業。隨著基因檢測、個性化給藥、產前診斷等的普及,在生物行業各領域都追求高通量、自動化的***,傳統DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優勢則愈來愈明顯:①能夠實現自動化、大批量操作,已有96孔的核酸自動提取儀,用一個樣品的提取時間即可實現對96個樣品的處理,符合生物學高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發時能夠進行快速及時的應對,這一特點使得傳統方法望塵莫及;②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內完成;③安全無毒,不使用傳統方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對實驗操作人員的傷害減少到**少,完全符合現代環保理念;④磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。利用人免疫球蛋白構建免疫磁珠富集金葡菌條件優化。北京蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠供應商

免疫磁珠捕獲法分離抗酸桿菌的實驗研究。上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

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標簽: 免疫磁珠
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