從白血病KG1a細胞中分選CD34+CD38-干細胞并研究其生物學特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細胞,流式細胞術分析細胞表面膜抗原,細胞周期,甲基纖維素培養體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內成瘤能力.結果分選的CD34+CD38-細胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細胞的活性差異有統計學意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細胞(P〈0.05).結論免疫磁珠法分選白血病干細胞簡單易行,分選的細胞符合白血病干細胞生物學特性.紅細胞膜免疫磁珠檢測成分血中抗A/抗B的研究。上海COIP免疫磁珠性能
COIP常見問題及對策
1：如何提高抗體與磁珠結合效率?
磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關，請確 認抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間（ 30～120min）、提高結合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強度（ 25～100mM NaCl）等方法提高親和效率。
2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?
可以先將抗體與樣品進行孵育，形成抗體-抗原復合物，再用 Protein A/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效 率，并降低磁珠與樣品接觸的時間，從而提高沉淀產物的特異性。對 于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。 黑龍江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。
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COIP 磁珠緩沖液匯總
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細胞裂解液
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正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
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結合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。
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應用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結果應用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經統計學處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導和成脂誘導證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。
免疫磁珠(Immunomagneticbeads,IMB),是由載體微球和免疫配基結合而成的一種納米級材料.免疫磁珠分離技術是以高均一性的磁性微球為固相支持物,將免疫配基(如抗體,抗原等)通過功能基團結合到磁性載體上形成免疫磁性微球,利用特異性的免疫學反應,在磁力作用下,發生力學移動,從混合溶液中分離出特異性的靶物質.具有分離速度快,效率高,可重復性好,操作簡單,不需要昂貴的儀器設備等優點.本實驗采用化學共沉淀的方法合成了納米級Fe3O4磁性微粒,具有顆粒均一程度高,懸浮穩定性好,超順磁性等特點,經固體物含量的測定及其粒徑的測定,磁珠的濃度約為7.9mg/mL,粒徑約為30～100nm左右,對其懸浮液加入烷基化試劑和醛基化試劑進行表面修飾,提高了磁性微粒的性能.利用BEENBIO免疫磁珠技術檢測大腸*細胞。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠代理價格4折起
免疫磁珠分選兔前軟骨干細胞及細胞研究平臺的建立。上海COIP免疫磁珠性能
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