免疫磁性細胞分選系統分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統,通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產物中的陽性細胞數,分離細胞的總細胞數×100%,細胞回收率:分離產物中的陽性細胞數,起始標本陽性細胞總數×100%。空腸彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。吉林anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
人腦**組織中分離,培養,純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經球計數法分析CD133+/-亞群細胞神經球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經干細胞(NSCs)標記物CD133,神經巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠送貨上門BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結果磁珠分離前后進行細胞計數,大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。
微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經干細胞并進行培養,為研究神經干細胞的特性與神經干細胞的培養和移植研究創造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結果分離的神經干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經干細胞群落簡便,有效,可以為神經干細胞的細胞培養和移植提供細胞來源.您了解免疫磁珠的優勢嗎?
免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養基下貼壁培養后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養基中有較強的增殖能力.對于不同的需求我們選擇不同的免疫磁珠系列。天津anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能
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化工工業在各國的國民經濟中占有重要地位,是許多大國的基礎產業和支柱產業,化學工業的發展速度和規模對社會經濟的各個領域有著直接影響。雖然近年來我國化工行業整體規模飛速壯大,但有限責任公司(自然)企業競爭力、收入能力、人均收入等方面指標與發達地區差距較大,在人均收入等部分指標上我國部分企業不足全球優先企業的1/10。加快提升企業重點競爭力,培育具有競爭優勢的企業和企業集團,是我國化工產業必須要下大力氣補齊的短板。科研試劑、耗材、儀器,納米脂質體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目的發展任務是提升示范升級水平、解決環保問題,關注競爭力,努力實現相關產業融合發展。招商型的優化有力地拉動了化工產業的市場需求,產業總體規模迅速擴大,領域不斷拓展、結構逐步調整、整體水平有較大提升,運行質量和效益進一步提高。吉林anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產廠家
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