利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經分離培養獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側坐骨神經,解剖鏡下剝離去除神經外膜,獲得神經束,將神經束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養液培養.7d后應用免疫磁珠法對細胞進行純化培養,培養2d后進行傳代接種.培養過程中對細胞進行形態學觀察,計數及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結果]分離培養所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養2d后就可以傳代.[結論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養,所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經的需要.那么免疫磁珠的優勢都有哪些呢?甘肅蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
免疫共沉淀(COIP)優點(1)相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的,處于天然狀態;(2)蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的,可以避免人為的影響;(3)可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。免疫共沉淀(COIP)缺點(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質-蛋白質相互作用;(2)兩種蛋白質的結合可能不是直接結合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;(3)必須在實驗前預測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預測不正確,實驗就得不到結果,方法本身具有冒險性。(4)靈敏度沒有親和色譜高。甘肅anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質量很好。
免疫磁珠細胞分選方法可以在幾分鐘內從復雜的細胞混合物中分離出很高純度的細胞。把細胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標記,磁性標記完后,把這些細胞通過一個放在強而穩定磁場中的分選柱。分選柱里的基質造成一個高梯度磁場。被磁性標記的細胞滯留在柱里而未被標記的細胞則流出。當分選柱移出磁場后,滯留柱內的磁性標記細胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標記和未標記的兩個細胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標記細胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標記物間的反應可在幾分鐘內完成。由于微型磁珠的體積極小,所以不會對細胞造成機械性壓力,而且使孵育時間短,操作過程快。免疫磁珠形成一個穩定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會***細胞或影響細胞的功能和活力,細胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細胞(即磁性標記細胞)可立即用于分析和隨后的實驗。
偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發光成像定量監測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統計學意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統計學意義(均P0.05).結論:偶聯單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.上海普平生物科技有限公司主營產品包括免疫磁珠。
戊二醛兩步交聯法將辣根過氧化物酶(HRP)結合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質量鑒定結果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.免疫磁珠法分離和純化胚胎神經干細胞。河南anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠供應商
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精原干細胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進行基因修飾新方法等研究的前提基礎。采用免疫磁珠分選法,使用干細胞抗體CD90.2進行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細胞分析法和定量PCR驗證了磁珠分選效率。流式細胞分析結果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結果:磁珠分選后支持細胞特異表達基因GATA4***下調(6倍)、SSCs表達基因GFRα-1上調(6.5倍)、生殖干細胞特異表達基因OCT4極***上調(5.9倍),3個基因相對表達量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細胞分析法所產生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉基因熒光的影響。甘肅蛋白質免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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