不同表達系統所生成的重組蛋白間有何主要區別？以賽默飛為例，Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產品通常在大腸桿菌，昆蟲細胞或哺乳動物細胞等不同的表達系統中產生。不同表達系統之間產生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾，如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經糖基化。在昆蟲細胞中產生的重組蛋白通常經有部分糖基化，但不含半乳糖和唾液脫鹽酸，糖鏈也無復雜分支。在哺乳動物細胞中生成的重組蛋白會發生附帶完全的糖基化修飾。備注：Mimic? Sf9 昆蟲細胞（來源于sf9昆蟲細胞系，經改造可穩定表達多種哺乳動物糖基轉移酶）可產生用于表達帶末端唾液酸和半乳糖的復雜的N-糖鏈。重組蛋白定制中的注意事項。大鼠BMP-2重組蛋白定制

如果一個實驗周期長于一周，或配制的細胞因子或重組蛋白一次用不完，我們就需對細胞因子或重組蛋白進行長期保存。千萬不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對多數蛋白均有很好的吸附作用，也就是說溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存，則溶液中的大部分細胞因子或重組蛋白均會粘附到管壁上，導致溶液中實際溶解的細胞因子或重組蛋白的濃度大為降低，表現為細胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是：將已重懸的細胞因子或蛋白用含載體蛋白，如0.1% BSA(牛血清白蛋白)，10% FBS(胎牛血清)，5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進一步稀釋，然后分裝凍存于-20℃至-80℃，即常規冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。無動物源性BMP-8重組蛋白定制如何長期保存重組蛋白？

由于重組蛋白通常在不同的表達系統中生產，容易受到各種因素的影響進而引起蛋白質的性質出現差異，因此為了保證獲得高質量，穩定的結果，在藥物分析、新藥研發、細胞 therapy等應用中優先選擇GMP（Good Manufacturing Practice, 良好生產規范）級重組蛋白。GMP要求企業從原料、人員、設施設備、生產過程、包裝運輸和質量控制等方面達到法規相關要求，形成一套可操作的作業規范。GMP級重組蛋白具有以下幾個優點：詳實的產品信息；嚴格的質量管理體系；批次間穩定性高；無外源動物源性。

如果說明書上沒有具體的說明，如何重溶（Reconstitute）凍干的重組蛋白？我們建議采用以下方式：（1）將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。（2）短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。（3）加入推薦的重溶緩沖液，達到產品說明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打，這可能導致蛋白質變性。（4）使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘，可使用360度搖床或手動輕輕上下顛倒。（5）每管體積不小于10μL分裝，并按產品說明書上的指示儲存。（6）如果小瓶內呈現薄片或顆粒，則在室溫下將產品混合幾小時，然后在4℃過夜。溶解后的重組蛋白如何保存？

重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題，買來的重組蛋白活性低怎么辦？除了重組蛋白自身存在質量問題外，它可能只是需要一個“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時，需要加入交聯抗體，進行交聯（Cross-linking）反應后才能表現出高活性，發揮出功能。其原理是，交聯反應能夠將重組蛋白的受體相互拉近，因為每個標簽抗體含有兩個抗原結合臂，從而能夠使兩個含標簽蛋白 - 受體復合物拉近，進而指數級放大下游信號，提升刺激的效率（表現為更低的 ED50 值）。眾所周知，在同一實驗中 ED50 越低表明著活性越高。重組蛋白的生物學活性定義。普欣IL-5重組蛋白

比較熱門的重組蛋白主要為重組細胞因子。大鼠BMP-2重組蛋白定制

重組蛋白疫苗是采用基因工程技術，將病毒的目的抗原基因構建在表達載體上，將已構建的表達蛋白載體轉化到細菌、酵母或哺乳動物或昆蟲細胞中，在一定的誘導條件下，表達出大量的抗原蛋白，再經提純并添加佐劑而制成疫苗。重組蛋白疫苗主要有三個優勢：不養活病毒，無需擔心病毒外泄，對生產車間的生物安全等級要求低；利用轉基因技術生產病毒S蛋白上的RBD蛋白，能實現高產量、高純度、低成本；重組蛋白疫苗只含RBD蛋白，純度高，安全性更好。大鼠BMP-2重組蛋白定制

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