通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。上海山羊精子分析BCF
HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對分析根據質量控制的要求,對新精子分析系統進行性能驗證后,應與舊系統進行一致性評價,從而保證檢測結果的準確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結果:兩臺儀器的方法內和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數均能符合比對要求,檢測結果具有相關性;對實驗儀器的檢測結果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經比對分析顯示符合質控要求。結論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結果具有可比性,檢測結果一致,可同時用于臨床標本的檢測。南京濃度精子分析負相差Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優點。
通過比較進行質量評估1.室內比較是采用同一個標本在同一參數下?經CASA多次測定后?應用適當的統計學方法對測得數值進行比較。在男科實驗室中對CASA系統的質量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標本進行日間比較。當室內比較作為結果質量的一種評估時?計算機中數值的在線獲得是極具優勢的。2.室間比較要求標本向其他幾個實驗室運送文獻中的一些報道闡述了該方面的經驗但是運動精子是不能在不受限制的條件下運輸的將其置于液氮中運送需進一步考慮更多的因素(解凍技術、標本的處理等)這些因素會影響活動力參數;到目前為止室間比較的研究還未見滿意報道;Jorgensen等進行了研究嘗試克服實驗室間運送解凍標本的困難其研究方式是:邀請四個實驗室的實驗人員攜帶各自的儀器到同一個地點以各自通常采用的實驗方法進行精子評估但未見明確的結論。3.對于精子活力測定CASA系統的測定與直觀評估的比較有文獻進行了報道但結果并不相同。認為直觀評估揭示標準數值且其差異是由CASA系統的錯誤引起的該觀點是不正確的;無論從理論上還是實踐中CASA數值比直觀評估所獲得的數值更接近于真值;對直線前進的精子比例而言這一點是非常正確的。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數據輸出。可以使用一次性的和可重復的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。IVOS能提供:精確、客觀、具有重復性的結果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態分析系統。HamiltonThorne的CASA系統適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產業、制藥公司等各種領域,成為了精液分析業的金標準。可以應用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩定性,能夠長時間穩定運行,保證數據的準確性和可重復性。
精子分析儀是計算機技術和圖像處理技術結合的**分析儀器設備,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數。計算機輔助**分析儀由硬件系統和軟件系統組成。硬件系統主要由顯微攝像系統、圖像采集系統、恒溫系統、計算機處理系統等四大系統構成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統:由顯微鏡及CCD組成。可以將標本信號通過顯微放大由CCD傳輸到計算機2.圖像采集系統:由圖像卡構成,其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理后,將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統:由加溫和保溫設備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內,提供穩定、可靠的檢查環境。4.計算機系統:對圖像信號進行***系統的加工處理,對獲得的數據進行輸出和存儲的設備。軟件系統采用**的精子質量分析軟件,利用現代化的計算機識別技術和圖像處理技術,對精子的動靜態特征進行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析全自動精子分析儀嚴格按照世界衛生組織(WHO)和KRUGER標準,并通過ISO9001認證。香港牛精子分析
CASA系統可以給出多種精子運動狀態的參數,這些參數能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。上海山羊精子分析BCF
精子分析儀使用注意事項1.樣品制備是CASA取得高質量檢查結果的關鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內自由運動。取樣分析前標本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計數池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計數的準確性。3.精子樣品密度過大時,造成圖像處理上的粘連,無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時,需增加檢查視野數量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。上海山羊精子分析BCF