無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。DMEM 含多種無機鹽,維持細胞內外滲透壓與離子平衡 。安徽華晨陽細胞培養基
細胞培養基的種類很多,按其來源分為合成培養基和天然培養基(目前使用的培養基絕大部分是合成培養基),按其物質狀態分為干粉培養基和液體培養基兩類。干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養基由專業商家提供,用戶可直接使用,非常方便。1、合成培養基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質:氨基酸氨基酸是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。因此,各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2周以上時,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖和醋酸等。無機鹽培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節細胞膜功能。黑龍江細胞培養基源頭廠家M199含有獨特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的維生素。
在細胞培養實踐中,選擇合適的 DMEM 培養基至關重要。對于生長較快、粘附性低的細胞,如某些腫瘤細胞和雜交瘤細胞,高糖型 DMEM 培養基是理想之選,其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細胞對能量的高需求,促進細胞快速生長。而對于一些原代細胞,因其對培養環境更為敏感,可能需要低糖型 DMEM 培養基,并根據細胞來源和特性添加特定的生長因子、營養補充劑等,定制專屬培養方案,為原代細胞提供**適宜的生長條件,提高原代細胞培養的成功率。
在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。MEM培養基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,主用于貼壁細胞培養,修改后也可用于其他細胞培養。
DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養基,在細胞培養領域占據著極為重要的地位。它源于經典的 Eagle 培養基,經科學家 Dulbecco 改良優化后,煥發出全新活力。DMEM 培養基成分豐富,氨基酸濃度是原始 Eagle 培養基的兩倍,還涵蓋了非必需氨基酸,為細胞蛋白質合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養基的四倍之多,積極參與細胞內各類代謝反應,助力細胞維持正常生理功能。同時,培養基中包含酸,這一糖酵解途徑的關鍵物質,在細胞能量供應方面發揮著重要作用,時刻為細胞的生命活動提供動力支持。針對細胞培養應用,我們提供多種組分的 McCoy’s 5A改良培養基。浙江樣本細胞培養基供應商
HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用的培養基之一。安徽華晨陽細胞培養基
干細胞研究同樣與 DMEM 培養基緊密相連。DMEM 培養基能夠為干細胞群體的維持和擴增提供適宜環境。以胚胎干細胞為例,高糖型 DMEM 培養基憑借充足的能量供應,助力胚胎干細胞保持良好的生長狀態,維持其多能性。在誘導干細胞分化為特定細胞類型時,科研人員可根據需求對 DMEM 培養基進行優化,添加特定的生長因子等成分,引導干細胞向目標細胞分化。比如,在神經干細胞向神經元細胞分化的研究中,通過調整 DMEM 培養基成分,促進神經干細胞的分化進程,為神經再生醫學研究奠定基礎。安徽華晨陽細胞培養基
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