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什么時(shí)候需細(xì)胞系鑒定?(1)當(dāng)建立或獲得一個(gè)新的細(xì)胞系時(shí)(2)一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)始/結(jié)束時(shí)(3)在細(xì)胞凍存之前,或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2~3個(gè)月時(shí)(4)發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前(5)細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(shí)(6)當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用超過(guò)一種細(xì)胞系時(shí),所有細(xì)胞系比較好先鑒定以排除交叉污染的可能。如何提供鑒定樣本?每種細(xì)胞需單獨(dú)收集在1.5ml離心管中,細(xì)胞數(shù)目不少于 106個(gè)。細(xì)胞需要離心沉淀,并且以PBS清洗盡可能去除上清培養(yǎng)基,沉淀沉淀進(jìn)行冰凍保存與寄送。細(xì)胞系鑒定目前主要基于國(guó)際身份認(rèn)證委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)。北京小鼠鑒定送樣要求
現(xiàn)如今,大家在購(gòu)買細(xì)胞株的時(shí)候,會(huì)面臨諸多突出的問(wèn)題︰①細(xì)胞活性不足,收到細(xì)胞后存活率不高,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法正常進(jìn)行;②細(xì)胞本身的質(zhì)量無(wú)法保證,除正規(guī)單位的細(xì)胞外,無(wú)法確認(rèn)細(xì)胞源本身質(zhì)量;③市場(chǎng)上以次充好、良莠不齊、魚龍混珠的假細(xì)胞比比皆是、無(wú)法分辨。如果你一不注意,使用了沒(méi)有經(jīng)過(guò)相應(yīng)的細(xì)胞鑒定的細(xì)胞、或者是被污染的細(xì)胞,極有可能的結(jié)果就是——論文的結(jié)論被否定、論文被召回,這中間大量的時(shí)間、物力和人力均被浪費(fèi),一切都要從頭再來(lái)。浙江小鼠STR鑒定標(biāo)準(zhǔn)常見(jiàn)的細(xì)胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯(cuò)誤鑒定,還有部分細(xì)胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯(cuò)誤鑒定了!
如何根據(jù)STR數(shù)據(jù)判斷細(xì)胞系的身份?收到細(xì)胞系鑒定結(jié)果以及STR信息,可以與參考數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)。如果細(xì)胞樣本的每個(gè)STR位點(diǎn)和參考細(xì)胞STR位點(diǎn)都能重合匹配,即說(shuō)明該細(xì)胞系正確,反之則說(shuō)明你的細(xì)胞系可能被錯(cuò)誤標(biāo)記,交叉污染或發(fā)生遺傳不穩(wěn)定。一般說(shuō)來(lái),匹配度≥80%即可認(rèn)為該細(xì)胞系正確,匹配度<80%則說(shuō)明該細(xì)胞系的來(lái)源需要被懷疑。如果細(xì)胞系被鑒定出發(fā)生交叉污染或錯(cuò)誤標(biāo)記,則需要拿更早代數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定,從而找到問(wèn)題的起源或者直接從可靠的機(jī)構(gòu)購(gòu)買一株新的細(xì)胞系。
細(xì)胞STR鑒定的特點(diǎn)如下:STR 圖譜鑒別通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的操作,采用自動(dòng)化的DNA分析儀對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行精確的分析,并以簡(jiǎn)單的數(shù)字描述STR序列重復(fù)次數(shù),不僅增加了結(jié)果的客觀性,而且所需細(xì)胞數(shù)量少(只需1×10^3個(gè)細(xì)胞),而細(xì)胞鑒定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×10^6個(gè)細(xì)胞,結(jié)果還沒(méi)那么穩(wěn)定,特異性也不強(qiáng)。總的來(lái)說(shuō),STR法分型快速、經(jīng)濟(jì)、易于自動(dòng)化,可重復(fù)性好,且數(shù)據(jù)格式適合建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)庫(kù)的特點(diǎn),所以應(yīng)用價(jià)值極大。建干細(xì)胞系并做規(guī)定項(xiàng)目的鑒定,顯然是快速發(fā)表論文的一種方式,是廣大醫(yī)生朋友喜聞樂(lè)見(jiàn)的。
本文購(gòu)自ATCC等機(jī)構(gòu)的細(xì)胞(如SW480,HCT116, FET細(xì)胞系等),均全部由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司鑒定。其中,HCT116細(xì)胞系,雖源于一個(gè)男性個(gè)體,但其現(xiàn)存細(xì)胞系在世界上有兩種性別,翼和公司以自己的專業(yè)對(duì)其成功的進(jìn)行了鑒定。文章認(rèn)為,盡管ABHD5在結(jié)直腸的發(fā)展中起著**抑制作用,但它通過(guò)促進(jìn)RNASET2介導(dǎo)的自噬,以Fu作為代謝的底物,虛弱了結(jié)直腸細(xì)胞對(duì)FU的敏感性。該研究表明ABHD5基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)、對(duì)基于FU輔助化療預(yù)后的有重要提示作用。2019翼和公司協(xié)助干細(xì)胞鑒定的六篇《Stem Cell Research》論文。浙江小鼠鑒定報(bào)告
討論細(xì)胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來(lái)越多的的期刊要求文章發(fā)表前、需提供細(xì)胞鑒定數(shù)據(jù)。北京小鼠鑒定送樣要求
翼和為您普及小知識(shí)點(diǎn):作者分別從國(guó)內(nèi)28個(gè)研究機(jī)構(gòu)搜集了278株常見(jiàn)人源**細(xì)胞系,其中國(guó)內(nèi)建立的細(xì)胞系71株,國(guó)外建立的細(xì)胞系207株。經(jīng)STR鑒定后發(fā)現(xiàn),來(lái)自于22個(gè)研究機(jī)構(gòu)的128株細(xì)胞存在交叉污染/錯(cuò)誤鑒定的情況,錯(cuò)誤率高達(dá)46%。其中國(guó)內(nèi)建立的細(xì)胞系占52株,這表明了什么,國(guó)內(nèi)建立的細(xì)胞系交叉污染/錯(cuò)誤鑒定率竟然高達(dá)73.2%,并且67.3%(35/52)國(guó)內(nèi)交叉污染/錯(cuò)誤鑒定的細(xì)胞系結(jié)果被證實(shí)是Hela細(xì)胞或被Hela細(xì)胞部分污染的!北京小鼠鑒定送樣要求
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。翼和生物自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。