二代測(cè)序法主要通過PCR的方法，對(duì)目標(biāo)SNP位點(diǎn)進(jìn)行特異性捕獲。為了提型的通量，目前多采用多重PCR的方法同時(shí)對(duì)多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行捕獲（可同時(shí)對(duì)1-100位點(diǎn)進(jìn)行分型）。由于二代測(cè)序通量是足夠滿足數(shù)百數(shù)千樣本的同時(shí)測(cè)序，因此需要對(duì)不同的樣本添加的樣本標(biāo)簽（Barcode），從而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析過程中，能夠進(jìn)行樣本拆分。因此在多重PCR完成輪多SNP位點(diǎn)捕獲后，需要進(jìn)行第二輪PCR，在輪PCR產(chǎn)物的基礎(chǔ)上，添加樣本樣本標(biāo)簽及測(cè)序接頭等序列。通過PCR條件優(yōu)化，目前亦可實(shí)現(xiàn)一次反應(yīng)，兩輪PCR接力完成的效果。但是只要這個(gè)突變?nèi)簺]有達(dá)到總?cè)后w的1%，它就只是一個(gè)突變株/系。達(dá)到了1%就是多態(tài)性了。浙江微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高

TaqMan熒光探針法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確性高（閉管進(jìn)行，減少污染），判讀也很方便，認(rèn)可度高；適合多樣本，少位點(diǎn)。但是其也有不可忽視的限制性，如探針合成耗時(shí)較長(zhǎng)，價(jià)格昂貴，為了保證探針的穩(wěn)定質(zhì)量，一般大家會(huì)選擇A公司合成。TaqMan熒光探針法一般為只有幾個(gè)位點(diǎn)時(shí)適用，并且對(duì)樣本的質(zhì)量要求較高，除了樣本無降解外，要需要濃度盡可能的一致。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司，地址：上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502安徽基因SNP分型報(bào)告?zhèn)鹘y(tǒng)的SNP檢測(cè)方法是采用一些已有的成熟技術(shù)，如DNA測(cè)序、、等位基因特異的寡聚核苷酸雜交(ASO)等。

通過風(fēng)險(xiǎn)值估計(jì)、置信區(qū)間和哈溫檢測(cè)，作者發(fā)現(xiàn)pre-miR-27a的rs895819位點(diǎn)，AG雜合子或者AA純合子相比GG純合子患MI的風(fēng)險(xiǎn)更低。并且將該位點(diǎn)的AG和AA基因型混合后相對(duì)于GG類型，混合后的樣本分組仍然患MI的風(fēng)險(xiǎn)更低。然而在其他4個(gè)前體miRNA的SNP在等位基因和建立的遺傳模型中并沒有發(fā)現(xiàn)與MI的比較明顯關(guān)聯(lián)。上海翼和**團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領(lǐng)下，秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神，為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。

為了評(píng)估在這些前體miRNA中的5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與中國(guó)漢族人群個(gè)體中潛在的關(guān)聯(lián)，作者采用了PCR-LDR的方法在287例心肌梗死病人和646個(gè)對(duì)照組樣本中檢測(cè)5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)的SNP分型。并用SPSS軟件分析了SNP位點(diǎn)與MI風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性。（其中，PCR-LDR法SNP分型在上海翼和生物有限公司完成）。上海翼和**團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領(lǐng)下，秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神，為科研用戶提供性價(jià)比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。對(duì)于候選SNP的遴選，有很多種考慮，總的趨勢(shì)和出發(fā)點(diǎn)是能夠涵蓋的SNP越多越好。

SNP挑選：（1）SNP位于非編碼區(qū)；（2）SNP平均分布在29條常染色體上；（3），小等位基因頻度（MAF）需大于30%，保證位點(diǎn)有足夠多態(tài)性；SNP鑒定方法~翼和Hi-SNP：59個(gè)SNP采用上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司的Hi-SNP技術(shù)，由本公司實(shí)施多重PCR建庫(kù)與illuminaX-10測(cè)序。上海翼和應(yīng)用生物**團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神，朝氣蓬勃，在肖君華博士的帶領(lǐng)下，秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神，為科研用戶提供性價(jià)比高、可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。完成這些化學(xué)反應(yīng)所采用的模式，包括液相反應(yīng)、固相支持物上進(jìn)行的反應(yīng)以及二者皆有的反應(yīng)。廣東STR/SSRSNP分型分析

SNP等位基因頻率的容易估計(jì)。浙江微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高

這種熔解分析只能區(qū)分在片段大小和GC含量上差別較比較明顯的DNA序列，比如檢查PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中是否存在引物二聚體及其他非特異性的擴(kuò)增。如果要區(qū)分SNP，分辨率還不夠。為什么呢？這里有必要先介紹一下飽和染料和非飽和染料。SYBRGreenI就屬于非飽和性染料，由于它對(duì)PCR的抑制作用，在實(shí)驗(yàn)中的使用濃度很低，遠(yuǎn)未將DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的小溝飽和。這樣，DNA雙鏈高溫變性時(shí)，單鏈部分的熒光染料分子發(fā)生重排，熒光染料分子重新結(jié)合到雙鏈DNA的空置位點(diǎn)，造成熒光信號(hào)沒有變化，因此出現(xiàn)假陰性，特異性下降。浙江微衛(wèi)星SSRSNP分型準(zhǔn)確度高

上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是一家服務(wù)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù)，是一家私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則，致力于提供高質(zhì)量的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測(cè)，生物技術(shù)服務(wù)。翼和生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念，打造高指標(biāo)的服務(wù)，引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。