DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學標記，在調控基因表達、細胞的分化與發育等過程中發揮著關鍵作用。使用基于重亞硫酸氫鹽測序的方法進行DNA甲基化評估：首先用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA可將未甲基化胞嘧啶轉化為尿嘧啶（黃色字母），而甲基化胞嘧啶保留為胞嘧啶（白色字母）；然后進行兩輪PCR：first輪PCR分別放大每個樣本的每個區域，并添加8個隨機核苷酸（N8）用于重復數據消除和適配體序列；在匯集每個生物樣本的擴增子后，第二輪PCR完成帶有樣本barcode的序列庫，用于多樣本NGS測序。重亞硫酸鹽測序可以從單個堿基水平分析基因組中甲基化的胞嘧啶。多重PCR技術甲基化重測序機構

亞硫酸氫鈉轉化是分析胞嘧啶甲基化效果比較好的工具之一。該方法基于亞硫酸氫鈉對 DNA 的處理，確定其甲基化模式。重亞硫酸鹽測序本質上就是重亞硫酸鹽轉化與二代測序（NGS）的結合。甲基化的金標準是亞硫酸氫鹽測序法：用亞硫酸氫鹽處理DNA，未發生甲基化的胞嘧啶能夠被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶則保持不變，通過后續的測序即可檢測。利用亞硫酸氫鹽的這種原理，可以衍生出多種甲基化檢測方法，如甲基化特異性的PCR和高分辨率熔解曲線法。成都bisulfite甲基化重測序報告上海翼和生物通過亞硫酸氫鹽處理，用PCR擴增目的片段，并結合二代測序平臺并對PCR產物進行測序。

DNA甲基化即在DNA上增加甲基基團，是使基因的轉錄抑制或沉默的主要方式。該修飾特異性地發生在CpG位點，胞嘧啶通過磷酸鹽與鳥苷酸連接(圖1)。甲基基團的插入改變了DNA的表觀和結構，可能會直接阻礙DNA的識別及與轉錄因子的結合，或者吸引其他因子優先與DNA結合，干擾轉錄因子的結合。目前已鑒定了三個與甲基化DNA結合的蛋白家族，包括MBD蛋白、Kaiso和Kaiso樣蛋白、以及SRA蛋白。通過招募這些蛋白，DNA甲基化可促進某些組蛋白狀態的維持，如去乙酰作用，從而保持轉錄后的組蛋白修飾。例如，MBD家族的甲基CpG結合蛋白2(MeCP2)與甲基CpG結合，招募HDACs，可促使染色體濃縮和轉錄抑制。

DNA甲基化是指在DNA甲基轉移酶的作用下，使胞嘧啶的5位碳原子發生甲基化的生物化學過程。DNA胞嘧啶甲基化是一種穩定的表觀遺傳學標記，在調控特定基因表達、轉座子沉默、基因印記、X染色體失活以及基因組穩定性等多種生物學過程中發揮著重要作用。在動物中，DNA甲基化主要發生在CpG二核苷酸的背景下，約為70-80%的DNA甲基化。然而，剩余未發生甲基化的CpG位點則主要密集分布于基因的啟動子區域和the first exon region，被稱為CpG島(CpG island)，在基因表達的調控和基因突變上都可能發揮著重要作用。NA甲基化在DNA復制起始、錯配修復等過程中對維持遺傳信息的穩定性發揮著重要的作用。

DNA甲基化是在DNA甲基化轉移酶(Dnmt)的作用下將甲基選擇性地添加到胞嘧啶上形成5-胞嘧啶的過程，剛被發現時被定義為第五種堿基，實際上它是一種重要的表觀遺傳學標記，在調控基因表達、維持染色質結構、基因印記、X染色體失活以及胚胎發育等生物學過程中發揮著重大的作用，獲得全基因組范圍內所有C位點的甲基化水平數據，對表觀遺傳學的時空特異性研究具有重要意義，Bisulfite甲基化測序是以新一代高通量測序平臺為基礎，結合全基因組Bisulfite處理和生物信息數據分析技術，進行低成本、高效率、高準確度的全基因組DNA甲基化水平圖譜繪制。DNA 甲基化能關閉某些基因的活性，去甲基化則誘導了基因的重新活化和表達。江蘇亞硫酸鹽甲基化重測序送樣要求

亞硫酸氫鹽處理能夠將基因組中未發生甲基化的C堿基轉換成U，進行PCR擴增后變成T。多重PCR技術甲基化重測序機構

在表觀遺傳中，DNA甲基化修飾具有非常重要的地位。其中胞嘧啶雜環5號位的甲基化修飾，又稱作5-甲基胞嘧啶（5mC），是**常見的甲基化修飾方式，也是迄今為止研究**為普遍的DNA甲基化修飾方式。一般認為當DNA甲基化出現在基因啟動子區，就會抑制基因轉錄，從而起到負調控的作用。DNA甲基化的形成機制，包括從頭合成（de novo），甲基化的維持（Maintenance）和去甲基化（Demethylation），這些過程分別由不同的基因和通路調控。這些基因和通路在動植物中即保守，又有所區別。多重PCR技術甲基化重測序機構

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