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DNA甲基化(DNA methylation)為DNA化學修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下,改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下,在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明,DNA甲基化能引起染結構、DNA構象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因表達。WGBS是基于重亞硫酸鹽的甲基化分析方法,首先通過Bisulfite對樣本DNA進行處理,將未甲基化的C堿基轉化為U堿基,而甲基化的C堿基則不會改變,進行PCA擴增后U堿基會變成T,與原本甲基化的C堿基區(qū)分開,再結合高通量測序技術,可繪制單堿基分辨率的全基因組DNA甲基化圖譜。甲基化的金標準是亞硫酸氫鹽測序法.廣州甲基化重測序技術服務
DNA甲基化主要發(fā)生在啟動子區(qū)CPG島,在調節(jié)基因表達和其他功能方面起著關鍵作用.異常的DNA甲基化可參與調控疾病相關的分子信號通路,從而影響其正常功能。DNA甲基化在生物個體的生長發(fā)育與繁殖過程中,維持遺傳物質的穩(wěn)定性是至關重要的。細胞采用多種機制來保證DNA復制的忠實性,如DNA的雙螺旋結構與半保留復制模式為遺傳物質的穩(wěn)定提供了物質基礎;DNA聚合酶Ⅲ除了具有DNA聚合酶活性外還具有5’到3’的核酸外切酶活性,可及時去除錯配摻人的堿基;DNA復制后存在多種修復機制進一步保證了遺傳物質的穩(wěn)定性。DNA甲基化在DNA復制起始、錯配修復、細菌中寄主控制的修飾與限制以及轉座子的失活等過程中對維持遺傳信息的穩(wěn)定性發(fā)揮著重要的作用。成都目標甲基化重測序哪個公司做WGBS全稱全基因組重亞硫酸鹽測序,該方法通過Bisulfite處理。
全基因組重亞硫酸鹽甲基化測序(WGBS)可以在全基因組范圍內精確的檢測所有單個胞嘧啶堿基(C堿基)的甲基化水平,是DNA甲基化研究的金標準。WGBS能為基因組DNA甲基化修飾的研究提供重要技術支持,能廣泛應用在個體發(fā)育、衰老和cancer發(fā)生等生命過程的機制研究中。其原理是用 Bisulfite 處理DNA序列,首先將基因組中未發(fā)生甲基化的 C 堿基轉換成U(T),從而與原本具有甲基化修飾的堿基C區(qū)分開來,然后進行PCR擴增,結合高通量測序技術,適用于全基因組范圍內繪制單堿基分辨率的DNA 甲基化圖譜。
DNA(主要是CpG的)甲基化是其遺傳機制和表型效應**為明確的表觀遺傳性機制。DNA甲基化譜式的變化不僅指導在正常發(fā)育過程中細胞譜系特化所依據的基因組轉錄譜式的改變,且在疾病發(fā)生和發(fā)展的基因表達異化中起著決定性的作用。為了高效準確的分析基因組中所有的甲基化位點,可采用全基因組甲基化(Whole Genome Bisulfite Sequence,WGBS)。亞硫酸氫鹽處理是一種分類5-甲基胞嘧啶和非甲基化堿基的有效方法之一,包括基于序列、熔化溫度和交互的分析,WGBS是通過重亞硫酸氫鹽使DNA中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)脫氨基轉變?yōu)槟蜞奏ぃ║),而甲基化的胞嘧啶保持不變,再經PCR將U轉變?yōu)門,結合NGS便可高效準確地分析基因組中所有甲基化位點。WGBS(Whole Genome Bisulfite Sequence)全基因組甲基化測序.
DNA甲基化是在DNA甲基化轉移酶(Dnmt)的作用下將甲基選擇性地添加到胞嘧啶上形成5-胞嘧啶的過程,剛被發(fā)現時被定義為第五種堿基,實際上它是一種重要的表觀遺傳學標記,在調控基因表達、維持染色質結構、基因印記、X染色體失活以及胚胎發(fā)育等生物學過程中發(fā)揮著重大的作用,獲得全基因組范圍內所有C位點的甲基化水平數據,對表觀遺傳學的時空特異性研究具有重要意義,Bisulfite甲基化測序是以新一代高通量測序平臺為基礎,結合全基因組Bisulfite處理和生物信息數據分析技術,進行低成本、高效率、高準確度的全基因組DNA甲基化水平圖譜繪制。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實現對基因表達的調控。北京bisulfite甲基化重測序分析
在前期全基因組甲基化測序等工作基礎上,利用Hi-MethylSeq技術對大規(guī)模群體的候選基因甲基化水平進行檢測。廣州甲基化重測序技術服務
DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因+表達。在甲基轉移酶的催化下,DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,這常見于基因的5'-CG-3'序列。大多數脊椎動物基因組DNA都有少量的甲基化胞嘧啶,主要集中在基因5’端的非編碼區(qū),并成簇存在。甲基化位點可隨DNA的復制而遺傳,因為DNA復制后,甲基化酶可將新合成的未甲基化的位點進行甲基化。DNA的甲基化可引起基因的失活。廣州甲基化重測序技術服務
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