采用基因編輯技術制備的細胞產品。對于采用基因編輯技術制備的基因修飾細胞產品，應進行體外在靶和脫靶活性評估，以確認修飾酶或向導RNA對靶基因序列的特異性。在評估基因編輯的脫靶風險時，應說明所選擇的評價策略的合理性和敏感性。雖然采用計算機分析預測基因編輯的潛在脫靶位點，并對潛在脫靶位點進行深度測序分析，可用于評估基因編輯的脫靶風險；但選擇的評價策略仍應包含體外全基因組測序比對，以證明潛在脫靶位點未出現脫靶。此外，在評估脫靶活性時，還應評估種屬特異性的差異、細胞病理生理狀態的差異或細胞類型的差異對非臨床數據預測性的影響。必要時，還應分析基因編輯對細胞表型和生理功能的潛在影響。針對已經獲得的有切割能力的sgRNA，需要進一步明確其體內脫靶效應。深圳off-target脫靶檢測安全性評價

CAR或TCR修飾的免疫細胞對于嵌合抗原受體（Chimericantigenreceptor，CAR）或T細胞受體（Tcellreceptor，TCR）修飾的免疫細胞，應盡可能采用多種方法評估其靶點相關毒性和脫靶毒性風險。對于靶點相關毒性，應采用體外方法深入分析靶點在人體qiguan、組織和細胞中的表達分布情況，基因表達分析庫和文獻調研也可能會有助于闡明靶點在不同病理生理狀態下的表達是否存在差異。應采用表達和不表達靶抗原的細胞作為靶細胞進行體外試驗，確認CAR或TCR修飾的免疫細胞可特異性的識別和殺傷靶細胞。對于CAR修飾的免疫細胞，應采用多種體外方法評估其胞外抗原識別區的脫靶風險。深圳crispr/cas9脫靶檢測安評內基因編輯技術可能造成的脫靶效應,建立了一種被命名為GOTI。

但是由于CHIP-seq實驗本身的難度較高，DISCOVER-seq這類方法的接受度并不高。3. 其他特殊方法CRISPR技術經過這么多年的發展，其應用已經不局限于造成DNA雙鏈斷裂，一些不要切割DNA雙鏈的CRISPR衍生技術（如堿基編輯、先導編輯和CRISPRi/a），可以在不引發隨機突變的情況下，對基因組進行精細編輯或者調控。這些技術所使用nCas9或dCas9只結合或者切割雙鏈中的一條鏈，之前的脫靶檢測方法都不能直接適用。這些CRISPR衍生技術中，CRISPR產生的脫靶可以被細分為兩個部分，其一是Cas9/sgRNA結合DNA導致的脫靶，這部分信息使用同樣序列的sgRNA進行野生型Cas9脫靶位點檢測能夠間接得到

近幾年，細胞和基因zhiliao（cell & gene therapy，CGT）領域發展迅猛，在多個方向取得了重大突破，以anti-CD19和BCMA為代的多種CAR-T免疫細胞療法攻克了一部分血液瘤，多種AAV療法也給一些難以成藥的罕見病提供了有效的zhiliao方案。另一方面，基于CRISPR基因編輯技術的眾多基因療法也進展迅速，較早體外基因編輯療法較快今年年底能夠上市（CRISPR Therapeutics CTX001），體內基因編輯療法取得了不錯的臨床數據（Intellia Therapeutics NTLA-2001），使用CRISPR技術制造的通用型CAR-T療法也是免疫細胞療法發展的一大趨勢（Caribou Biosciences CB-010）。種子基因脫靶檢測機構推薦唯可。

GUIDE-Seq脫靶評估技術的優勢分析鼓潤致力于基因組編輯工具脫靶的分析檢測工作，為篩選、優化基因組編輯工具的保真性提供標準化的分析。我們脫靶分析具有如下優勢：實用性強：能反映CRISPR在真核細胞中進行基因編輯的在靶與脫靶情況，以進行安全性和有效性評價；檢測通量高：一次能檢測多個樣本的在靶與脫靶情況，并通過優化的標簽設計，降低實際的測序reads數量；準確性高：絕大部分檢測結果可被驗證；靈敏度高：能夠高效檢測出低頻脫靶位點，檢測低至0.1%的脫靶突變；實驗難度低：操作過程簡單易行細胞適應性強。脫靶檢測guide-sequence，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。南京基因編輯技術脫靶檢測服務

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國內外基因zhiliao產品開展的非臨床研究、長期隨訪獲得的臨床經驗以及基因組整合位點分析方法的明顯改進，都有助于更好地理解整合性基因zhiliao載體相關風險。通常認為，很多能夠介導外源基因轉入細胞核的載體（如逆轉錄病毒載體、轉座子元件和基因編輯產品等）有基因組整合潛力，需要通過長期隨訪觀察遲發性不良反應的風險；根據目前的認識和研究數據，質粒、痘病毒、腺病毒和腺相關病毒（AAV）等載體的基因zhiliao產品整合風險較低，國際上開展的臨床試驗中也表現出較低的遲發性不良反應風險。當載體或基因zhiliao產品原有的風險特征增加時，例如經過修飾以攜帶基因組編輯成分的質粒或改變給yaofang式以提高整合能力等，需要提高對長期隨訪觀察的要求；反之，也可以對目前認為存在遲發風險的基因zhiliao載體進行修飾，以降低這些風險。深圳off-target脫靶檢測安全性評價