確證性臨床試驗。與其它藥物一樣，免疫細胞zhiliao產品的確證性研究（或關鍵研究）的目的是確認探索性研究中初步提示的療效和安全性，為注冊提供關鍵的獲益/風險評估證據。確證性研究的目標人群、主要和次要終點的選擇、研究持續時間、樣本量估計和統計學設計等應符合具體zhiliao領域的一般指南要求。對照和設盲，良好的隨機對照試驗（randomizedcontrolledtrial,RCT）是確證性研究中優先推薦的設計方法，該研究方法可以消除受試者的基線差異、減少偏倚，有利于客觀評價試驗產品的zhiliao效果。對于某些適應癥，可能缺少合適的對照藥物，或倫理上不宜采用安慰劑作為對照藥，可考慮與比較好支持性護理或zhiliao進行對照。整合位點CRO，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。無錫AAV整合位點方法

當產品預期的活性成分可以明確時，申請人往往選擇較能代預期活性的特定細胞亞群來描述產品劑量，例如，很多導入外源基因的免疫細胞zhiliao產品中的載體陽性細胞數。在這種情況下，申請人還應描述載體陽性細胞數與其它細胞成分的比例，并分析轉導效率對患者安全性及有效性的影響。劑量遞增，在惡性liu患者中開展早期探索性臨床試驗時，申請人經常選擇3+3、改良毒性概率區間（mTPI）和貝葉斯比較好區間（BOIN）等設計。對于shou次開展人體臨床研究的免疫細胞zhiliao產品，在選擇劑量探索試驗每個劑量組的樣本量以及組間劑量增幅時，還應考慮非臨床研究及類似產品的臨床經驗中劑量變化對受試者安全性和有效性的影響。載體整合位點安全性評價整合位點和復制位點。

劑量探索和劑量遞增，起始劑量的估算。shouci人體試驗的起始劑量，通?；诜桥R床安全性研究結果。與小分子或生物大分子藥物相比，免疫細胞zhiliao產品的非臨床研究方法受到多種因素影響，例如動物模型的選擇、免疫應答的種屬差異等，對人體安全起始劑量的預測可能不如其他藥物精確。如果有可用的動物實驗或體外數據，可能有助于判斷起始細胞劑量的風險水平。如果有同靶點同機制的同類或相關產品的既往臨床經驗（即使采用不同給藥途徑或不同適應癥），也有助于臨床起始劑量的選擇。

2018年CTL019的一項臨床試驗中，一名B-ALL病人在接受CAR-CD19zhiliao28天后即達到CR，卻在6個月后復發，PCR檢測沒有發現任何的RCL，結合持續性慢病毒插入位點的克隆豐度分析，研究者較終發現一個攜帶CAR插入位點的CAR-B細胞克隆。進而發現這個B細胞是CAR-T生產過程中的一個CAR-B副產物，而CAR在該B細胞上的順式插入表達導致CAR靶標表位屏蔽，導致該B細胞克隆的耐藥。這個案例也提示除去CAR-Tzhiliao方法本身的潛在風險外，CAR-T在生產工藝也會產生二次成瘤的風險。插入位點整合位點，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。

給藥間隔，對于shou次在人體中開展臨床試驗（firstinhuman,FIH）的免疫細胞zhiliao產品，采用受試者間隔給藥的方式，可以避免多個受試者同時暴露而出現預期外的安全性風險。在FIH試驗中，對首例患者應加強不良事件監測，還要考慮遲發性不良事件。向同一劑量組內下一例受試者或下一個劑量組受試者給藥前，應規定一定的隨訪間隔，以觀察急性和亞急性不良事件。間隔期的選擇一般基于非臨床研究中急性或亞急性毒性的發生情況，細胞在體內的活性持續時間和/或既往類似產品在人體中的應用經驗。通過分選CAR-T 細胞,對T細胞受體(TCR)β鏈庫進行深度測序(TCR-seq)以及慢病毒載體整合位點(LVIS)分析。無錫AAV整合位點方法

病毒整合位點，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。無錫AAV整合位點方法

插入突變風險評估一些整合性載體（如逆轉錄病毒、慢病毒、轉座子）可將外源基因插入整合到細胞基因組中，這可能會導致關鍵基因突變或jihuo原基因，從而導致惡性liu風險增加。影響插入突變的關鍵風險因素包括：（1）載體的整合特征，如插入位點的偏好性；（2）載體的設計，如增強子、啟動子等構建元件的活性，影響鄰近基因的潛力；產生剪接突變體的潛在剪接位點或多聚腺苷酸信號等；（3）細胞載體拷貝數；4）轉基因表達產物的功能活性（如與細胞生長調控相關）和表達水平；5）靶細胞群的轉化可能性，這可能與細胞的分化狀態、增殖潛力、體外培養條件和體內植入環境等有關。無錫AAV整合位點方法