臨床研究人群，如果一種基因zhiliao產品具有引起遲發性不良反應的風險，需要開展長期隨訪觀察時，所有接受基因zhiliao產品的受試者在簽署知情同意書后均應入組長期隨訪臨床研究。在設計長期隨訪臨床研究的方案時，應考慮目標受試者人群及特征、整體健康情況以及接受zhiliao的患者的預期生存期等特征對遲發性不良反應的收集的影響。通常來說，當臨床研究人群的某些特征（如預期壽命短、多重合并癥、以及暴露于放療或化療等其他藥物）可能干擾遲發性不良反應的觀察分析時，會影響長期隨訪觀察在評估和減輕受試者風險方面的效用；而在病情較輕或較局限，合并癥以及伴隨zhiliao有限或較穩定的受試者中，通過長期隨訪觀察收集到的評估數據可能更容易分析。種子基因脫靶檢測多少錢？江蘇off-target脫靶檢測報告

細胞經基因修飾后會改變其生物學特性，同時也會帶來新的安全性風險，如基因編輯脫靶風險、載體插入突變風險、載體重組風險、表達的轉基因產物的風險等。細胞經基因修飾后會改變其生物學特性，同時也會帶來新的安全性風險，如基因編輯脫靶風險、載體插入突變風險、載體重組風險、表達的轉基因產物的風險等。基于基因修飾細胞的產品種類繁多、各有特點，除上述一般技術要求外，還應基于產品的性進行相應的特殊考慮。本指導原則列舉了以下三種情形的特殊考慮。北京基因療法脫靶檢測分析基因編輯治療過程中安全性評價，即脫靶效應的檢測。

如何檢測脫靶效應？在gRNA修飾中，截短的sgRNA是一種減少脫靶效應的簡單方法，并且基于RNP的遞送在大多數情況下適用于獲得更高的目標活性。此外，選擇合適的Cas變體對于減少脫靶效應也至關重要。但選擇合適的脫靶檢測工具，也是重中之重。脫靶預測結合PCR檢測法，利用脫靶預測軟件預測潛在的脫靶位點，PCR擴增預測的脫靶位點，利用直接測序或酶切法檢測脫靶情況。操作簡便、成本低偏倚性預測。全基因組測序，一種通過高通量測序檢測脫靶突變的方法，需要選擇適當的參考基因組過濾背景突變，數據比對分析獲得含有PAM基序的潛在修飾位點，進一步基因擴增驗證其突變情況。高通量全基因組范圍檢測可檢測SNPs，Indels和染色體水平變化。

以上長期隨訪時間的建議主要基于基因zhiliao的產品類型，具體產品的隨訪時間取決于產品的特性和體內存在時間、轉基因表達時間、遲發性不良反應的預期時間及發生率、受試者適應癥和預期生存期、給藥途徑、以及長期隨訪的其他觀察目的。隨著隨訪數據的積累，研究者和研究申辦方可能會根據產品的存在情況、轉基因表達和臨床表現的持續評估情況，延長或縮短長期隨訪的持續時間。如果研究申辦方認為其基因zhiliao產品安全性風險較低、無需開展長期隨訪臨床研究，或者希望變更隨訪時間，應合理說明依據或變更理由并與藥品監督管理部門進行溝通。如何檢測是否發生脫靶？

2022年2月下旬，在醫麥客舉辦的年度盛會——“蓄力前行，助航新生——2021 CSGCT基因與細胞zhiliao醫學峰會”期間，唯可生物創始人兼CEO-吳寧博士分享了唯可生物在基因zhiliao賽道針對安全性展開的技術服務，讓在場行業大咖和觀眾真正領會到ISA(integration site analysis，整合位點插入分析)領域國際金標準技術的優勢，以及基因編輯定量脫靶檢測、載體拷貝數檢測、載體質量控制等多項檢測技術的行業意義。吳寧博士畢業于德國海德堡大學，德國國家aizheng研究中心(DKFZ)，并于2021年3月同幾位合伙人聯合創立了上海唯可生物科技有限公司。其創始團隊擁有的檢測技術包括源于DKFZ，Manfred Schmidt團隊的LAM-PCR(linear amplification-mediated Polymerase Chain Reaction，線性擴增陽離子介導的聚合酶鏈反應)，LTA-PCR(Ligation-mediated target amplification Polymerase Chain Reaction，連接介導的目標擴增聚合酶鏈反應)和TES(Target enrichment sequencing，靶向富集測序)體系，并基于此形成的多項全球lingxian的基因zhiliao安全性檢測技術。脫靶檢測guide-sequence，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。溫州種子脫靶檢測CRO

高深度全基因組重測序服務,該方法能多方位精細地對基因編輯的細胞或個體進行off-target檢測。江蘇off-target脫靶檢測報告

目前鼓潤已掌握了該項技術，簡述如下：1、CRISPR與dsODNtag整合的實驗技術及高通量測序建庫流程將靶向于目標基因組位點的CRISPR質粒與dsODNtag以核電轉的方式同時轉染入真核細胞，CRISPR造成基因組雙鏈斷裂后，dsODNtag將整合入斷點處，作為后續分析在靶與脫靶情況的標記。轉染后3天收集細胞的DNA進行高通量建庫。2、GUIDE-seq生信分析方法1）搭建了高通量測序的數據分析流程。2）利用該技術分析了CRISPR靶向編輯某細胞系基因的在靶與脫靶情況。其中一例樣品的分析結果如圖4所示：Sequencesofoff-targetsitesidentifiedbyGUIDE-seq.Theintendedtargetsequenceisshowninthetoplinewithcleavedsitesshownunderneathandwithmismatchestotheon-targetsiteshownandhighlightedincolor.GUIDE-seqsequencingreadcountsareshowntotherightofeachsite.3）利用PCR擴增技術聯合Sanger測序鑒定了分析出的脫靶位點。江蘇off-target脫靶檢測報告