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華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR系統

來源: 發布時間:2023-04-06

在精細診療領域,患者外周血中的循環DNA(ctDNA),在的早期篩查,圍術期監測,藥物療效評估,預后等方面具有重要的臨床應用價值。在肺液體活檢領域,EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實現精細檢測顯得尤為重要。研究表明,相較于熒光定量PCR,數字PCR對于血液ctDNA的檢測靈敏度更高(0.01%),EGFR突變的陽性檢出率也更高。在患者術后復發檢測中,數字PCR評估出的ctDNA陽性,可以早于影像學數月提前揭示出患者復發。因此,該項技術在肺精細診療中具有重要的作用。20世紀末,Bert Vogelstein等提出數字PCR的概念。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR系統

在定量PCR時,我們常常糾結一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結了,因為數字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。法國國產數字PCR拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。

數字聚合酶鏈式反應(digitalpolymerchainreaction,dPCR)技術因具有高靈敏度、受基質干擾少等優勢而被廣用于轉基因食品檢測。本研究綜述了數字PCR技術的原理、系統各部件的優劣勢,梳理了數字PCR技術在轉基因檢測與溯源技術(標準物質)方面的進展和發展趨勢,以期為轉基因食品檢測領域提供參考依據。dPCR的擴增過程大致上可以分為3步:樣品的分散、樣品的熱循環擴增和樣品的檢測。對于數字PCR儀器系統,各個部件之間仍然有較大的改進空間,要發揮部件之間的協同作用是很重要的,而且有持續研究的價值。表1中總結了部分常見的數字PCR系統的類型,以及相對在硬件、便攜性、性價比和自動化程度上的比較。

二項式分布是一個離散概率分布,它給出了m次試驗中k次成功的可能性,每次試驗的概率為p,例如當擲骰子時,二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數字PCR的情況中,投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區中,當目標落在選定的分區中時,就是成功。如果有n個分區,并且分區過程是完全隨機的,則目標出現在所選分區中的概率為1/n。該試驗重復m次,樣品中的每個分子一次。更多關于PCR的相關信息,歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。全自動數字PCR平臺,讓數字PCR真正邁入新時代,助推數字PCR普及應用。

數字PCR技術的出現不是為了完全取代原有分子診斷技術,而是更好的補充和完善現有技術平臺。數字PCR為不同應用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在臨床檢測方面。國產數字PCR企業在商業化應用方面,也不斷“攻城略地”。數字PCR作為當下靈敏的核酸檢測技術,盡管目前國產數字PCR企業異軍突起,在臨床市場中實現了彎道超車,但未來仍然需要聚焦客戶需求,不斷夯實底層創新,同時在檢測成本、自動化、試劑盒申報注冊、出海國際化等方面不斷努力,提供更為的解決方案。國際局勢,波譎云詭。在百年未有之大變局,實現中華民族的偉大復興,需要國內企業瞄準技術高地,以爭分奪秒的精神,解決技術"卡脖子"的難題,不斷攻堅克難,自主創新,在與國際品牌的同臺競技中,彰顯中國實力。數字PCR具有諸多優點,但也存在一定的不足,如成本高、儀器操作復雜、經濟效益低等。美國賽默飛數字PCR價格

dPCR儀器在操作中集成了前處理以減少手工移液和樣品轉移的操作,增加了通量,并在價格上具有優勢。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR系統

對于檢測需要高靈敏度以及技術確認的情況下,數字PCR技術也可以發揮重要作用。技術數據表明,數字PCR技術對的比較低檢測下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經測試,數字PCR在檢測和診斷的某些方面優于金標準qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數字PCR特異性、靈敏度、重現性和檢測限受影響更小。因此,未來預計數字PCR技術也將在類疾病中得到更加廣的應用。數字PCR的應用甚廣,除了可應用于進行突變的檢測以外,也可運用于基因擴增的檢測。通過數字PCR技術可建立多重熒光體系,用于同時檢測比如非小細胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴增。有研究報道,使用數字PCR技術對436例非小細胞肺樣品進行檢測,并挑選樣本驗證了數字PCR與RNA fish的檢測一致性。結果表明,該數字PCR技術在保證了基因擴增檢測準確性的同時,還節約了檢測時間。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR系統

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