培養基的制備:復水時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養基中,影響微生物的生長;容器的大小需大于復水后培養基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養基溢出;含有瓊脂粉的培養基,在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘;加熱培養基時一定要進行攪拌,特別是瓊脂類培養基。為避免燒焦和沸騰溢出,對于少量的培養基很好使用沸水浴進行加熱。燒糊的培養基營養物質被破壞,并可產生有毒物質,如發現焦化,或未溶解均勻前培養基有溢出,該培養基即不能使用,應重新制備。對于瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,很多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去??焖偕郎刂聊繕藴囟龋ㄈ?21°C)可確保徹底殺滅微生物(包括耐熱芽孢),避免因升溫慢導致滅菌不徹底。湖南培養基消毒 培養基制備器
Systec培養基準備器的工作模式:它擁有2個主要工作模式與2個附加模式可供選擇,參數可自己設置。1.標準模式:制備標準培養基、或高敏感性培養基。滅菌溫度/時間及分裝時間均可設置。2.巧克力瓊脂模式:一種特殊的2步制備程序,可制備復雜培養基。在一次滅菌后可通過補料口添加營養物質,如血液等,然后進行二次升溫。3.水浴模式:正式滅菌前在30–80°C下,對培養基進行溶解處理。在滅菌鍋中可以放置玻璃器皿,并對玻璃器皿中的液體進行水浴加熱。4.滅菌模式:啟用滅菌模式后,可以當作普通的臺式滅菌器,用來對少量試管、燒瓶等玻璃器皿滅菌。湖南培養基消毒 培養基制備器培養基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加!
培養基的類型-根據培養基的用途來區分,可分為選擇培養基、增殖培養基、鑒別培養基等。1)選擇培養基在培養基中加入某種物質以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養基,稱之為選擇培養基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。2)增殖培養基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養物質,以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養基稱為增殖培養基,這種培養基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養基也是一種選擇培養基。3)鑒別培養基在培養基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區分的微生物經培養后呈現出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。
培養基配制--稱量:培養基的制備環節,應當嚴格按照培養基配方制備,在培養基的稱量過程中,建議在干爽、無風的區域或者通風柜中進行,這樣能夠避免培養基吸潮使稱量結果不準。應當選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準確性,同時稱量過程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質混入培養基中。操作人員應當對稱量過程進行詳細的記錄,記錄中應該體現培養基名稱、批號、稱量數量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調查??焖贉缇绦蚩稍?0分鐘內完成標準培養基處理。 支持固體、液體及半固體培養基的一體化制備。
三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材,也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角培養瓶,很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。培養基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養基流進去!湖南培養基消毒 培養基制備器
培養基制備器負載的壓力,有效地避免了培養基過溫失效和培養基中氣泡的產生。空氣壓縮機是內置的!湖南培養基消毒 培養基制備器
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。湖南培養基消毒 培養基制備器