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湖北空間轉錄組價格

來源: 發布時間:2021-11-12

有哪些技術手段可以進行空間轉錄組研究?已發表的關于空間轉錄組技術有Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。這些方法或是在細胞數量上限制較大,或是存在有效測序深度不足等問題。10x Genomics公司提供的Visium空間基因表達解決方案是目前較好的一個高通量空間轉錄組的商業化解決方案。該解決方案可以輕松地將空間轉錄組學技術應用到組織切片和染色的標準方法中,從而研究空間分辨率下整個轉錄組mRNA的表達情況,同時在同一組織切片中獲得組織學相關信息??臻g轉錄組學技術主要包括 MERFISH 和 seqFISH。湖北空間轉錄組價格

高通量空間轉錄組學數據的處理和分析需要新穎的方法和工具支撐,尤其是在預處理、scRNA-seq 數據的空間重構、基于微陣列數據的細胞類型去卷積、空間高變基因的識別、細胞間相互作用的推導等。scRNA-seq 技術的進步啟發了利用高分辨率轉錄組定量分析與空間轉錄組學數據的互補性質的新方法。對于未進行轉錄組測序的 smFISH 和 ISS 數據,可通過 scRNA-seq 數據估算空間數據中未分析的基因的表達模式。此外,“空間轉錄組學”這一術語的變體,也用于描述將轉錄本定位到細胞器的技術(例如 APEX-seq),盡管該技術沒有記錄任何空間坐標。江西10x空間轉錄組早期空間轉錄組學的另一條發展路線是基因捕獲和增強子捕獲篩選。

當前的技術主要有四種策略:1、基于組學實驗結合空間重建的計算策略。這種計算方法可以充分利用內在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉錄組數據中重構細胞間的環境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現空間趨勢或特定組織的總體布局。2、激光切割與NGS測序結合的策略?;贚CM的轉錄組學或基因組學成功地獲得了單個細胞的空間轉錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數據粗略地整合到構成***的巨大背景中,可能具有一定價值。3、基于熒光物質原位的轉錄組學?;趫D像的原位轉錄組學在很大程度上增加了可檢測區域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉錄本積累等復雜背景中提取單個細胞。4、基于寡核苷酸的空間條碼加上NGS測序。費用較高且無法在單個細胞中獲得轉錄組。

什么是空間轉錄組?空間轉錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數據的技術,從而解析單個組織切片中的所有mRNA??臻g條形碼逆轉錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,使得在mRNA樣品處理和后續測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉錄組技術可獲取組織中具體的位置的轉錄信息,為研究和診斷提供有效數據支撐。歐易生物具有上百例空間轉錄組項目執行經驗,致力通過質量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破??臻g轉錄組數據分析軟件開發語言統計情況。

廣義上來說,目前一共有4種解析“空間性轉錄組”的策略:2.第一種是利用計算機算法,根據單細胞轉錄組數據來模擬重構組織的空間形態。例如Seurat,這是一個在單細胞數據分析中***用到的R包,我們可以利用scRNA-seq數據,加上對markegene進行原位測序的結果來重構組織的空間信息。3.第二種,激光顯微切割+二代測序(LCM+NGS)。這種技術對儀器和實驗人員的操作要求較高,而且獲取的通量也比較低,如果組織非常珍貴或者研究的內容十分精細,可以考慮這個。但是這種策略比較難被官方干運用。4.第三種策略,就是基于高分辨圖像的原位測序。**經典的是smFISH當然,這種方法的通量比較低。當然隨著技術的發現,剛發布的FISH-seq技術通過多輪雜交的方式,已經把測序通量提高到了10000+個轉錄本。5.***就是“基于空間條形碼(spatialbarcodes)的空間轉錄組技術。本文主要討論的也就是這種技術。后面主要討論的都是基于這種策略。 空間轉錄組測序技術在進行 HE 染色的同時需要保證獲取組織基因表達信息。福建歐易生物空間轉錄組使用

作者通過對三個人類腦皮層組織的空間轉錄組測序,可評估不同腦皮層區域中基因表達特征和細胞類型定位情況。湖北空間轉錄組價格

10x Genomics空間轉錄組技術的準確性高嗎?下圖是一個將10x Genomics空間轉錄組技術應用于小鼠海馬體研究的案例。A圖為腦組織切片的HE染色結果,從10x Genomics空間轉錄組分析結果中,可以清晰看到Tmsb4x(B圖)和Selenow(C圖)在海馬體區域高表達,和已知的研究結果一致性較高。開展10x Genomics空間轉錄組需要做哪些準備?空間轉錄組是一項十分前沿的技術,涉及到很多細節方面的準備工作,例如組織類型的選擇、前期預實驗的設計、病理區域的確認等一系列內容。而且實驗中存在很多不確定性因素,處理不慎容易導致整個項目失敗。湖北空間轉錄組價格

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