早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉(zhuǎn)錄分析(nuclearrunontranscrip-tionassay)時,在體外將細胞核分離出來,然后在α-32P-ATP的存在下進行轉(zhuǎn)錄,所合成mR-NA均摻入同位素而得到標記,此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾膜上的某一特定的基因的DNA進行雜交,便可反映出該基因的轉(zhuǎn)錄狀態(tài),這是一種反向探針實驗技術(shù)。探針卡是一種測試接口,主要對裸芯進行測試,通過連接測試機和芯片,通過傳輸信號對芯片參數(shù)進行測試.。楊浦區(qū)特制探針品牌
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現(xiàn)場調(diào)查及蟲種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統(tǒng)的檢測一次,需幾天或幾個星期的時間,精確度不高,而用DNA探針只需一天。據(jù)報道,能從1t水中檢測出10個病毒來,精確度**提高。RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。嘉定區(qū)特制探針推薦貨源還能全自動進行批量(預(yù)置9999測試點)定量分析。
這樣我們可以事先建立一系列θ角與相應(yīng)元素的對應(yīng)關(guān)系,當某個由電子束激發(fā)的X特征射線照射到分光晶體上時,我們可在與入射方向交成2θ角的相應(yīng)方向上接收到該波長的X射線信號,同時也就測出了對應(yīng)的化學(xué)元素。只要令探測器連續(xù)進行2θ角的掃描,即可在整個元素范圍內(nèi)實現(xiàn)連續(xù)測量。由分光晶體所分散的單一波長X射線被X射線檢測器接受,常用的檢測器一般是正比計數(shù)器。當某一X射線光子進入計數(shù)管后,管內(nèi)氣體電離,并在電場作用下產(chǎn)生電脈沖信號。
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號強度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好轟擊在分析點上,同時也保證了分析點處于X射線分光譜儀的正確位置上。在電子探針上大多使用的光學(xué)顯微鏡是同軸反射式物鏡,其優(yōu)點是光學(xué)觀察和X射線分析可同時進行。放大倍數(shù)為100-500倍。可以進行點、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。
電子探針X射線顯微分析儀(簡稱電子探針)利用約1Pm的細焦電子束,在樣品表層微區(qū)內(nèi)激發(fā)元素的特征X射線,根據(jù)特征X射線的波長和強度,進行微區(qū)化學(xué)成分定性或定量分析。電子探針的光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)等部分與掃描電鏡基本相同,通常也配有二次電子和背散射電子信號檢測器,同時兼有組織形貌和微區(qū)成分分析兩方面的功能。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機系統(tǒng)以外,還主要包括分光系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)等部分。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同,它們常常組合成單一的儀器。除H、He、Li、Be等幾個較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進行定性和定量分析。楊浦區(qū)特制探針品牌
背散射電子圖像系統(tǒng)。楊浦區(qū)特制探針品牌
在原核表達系統(tǒng)中外源基因不僅進行正向轉(zhuǎn)錄,有時還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達不高的重要原因。另外,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生反義RNA,參與自身表達的調(diào)控。在這些情況下,要準確測定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測的合適標記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補的原理,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,以檢測被測靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進行標記。楊浦區(qū)特制探針品牌
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