2013年下半年，Life-technologies推出了QuantStudio 3D數字PCR系統， 這也是目前數字PCR市場上***型號的產品。采用高密度的納升流控芯片技術，樣本均勻分配至20,000個單獨的反應孔中。在整個工作流程中，樣本之間保持完全隔離 ，可以有效地防止樣品交叉污染，減少移液過程，簡化操作步驟。同時芯片式設計避免了微滴式系統可能面臨的管路堵塞問題。作為Life-technologies在OpenArray芯片平臺之外推出的全新的芯片式數字PCR系統，值得一提的是，這個全新的系統在設計理念上綜合考慮了系統穩定性與運行成本因素，直接反映了該系統“適合所有分子生物學實驗室使用的數字PCR系統”的市場定位。市場想象空間大，國內外入局者眾多。浙江數字PCR數字PCR怎么樣

使用不合適的引物可能會引入引物二聚體、非特異性擴增等，進而影響實驗結果的準確性。在此，小Q建議您在設計引物時需做以下幾個方面的檢查，***需對設計好的引物進行BLAST比對分析，以確保引物的特異性！在數字PCR***定量實驗中，對于基因突變檢測、基因表達差異分析和拷貝數變異鑒定等對實驗精細性要求較高的實驗，需要特異性更高的Assay。QIAGEN基于QIAcuity數字PCR平臺開發并驗證了針對上述常見應用的700多組dPCR LNA Assay，所有Assay均經過鎖核酸修飾來增強其對互補序列的親和力和特異性，進而提高實驗結果的準確性。浙江高精確度數字PCR經驗豐富數字PCR技術為基因表達分析提供了高精確的定量分析方法。

肺*的ALK融合基因檢測：ALK融合基因是NSCLC患者另外一個常規的伴隨診斷，可以指導ALK-TKI藥物的使用，目前已發現20種以上EML4-ALK的融合形式，多個報道證實它們中大部分能促進**生成。另外ALK還可能與TFG、KIF5B、KLC1、PTPN3、STRN等基因發生融合，因此ALK融合突變的診斷具有一定難度。目前臨床常規使用的檢測手段包括免疫組化（Immunohistochemistry，IHC），熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）以及RT-PCR等三種。這三種方法各具優缺點：IHC相對簡單，價格低廉，但是容易受到主觀判斷的影響；FISH可以檢測各種融合類型，但是操作繁瑣，價格昂貴；RT-PCR方法的特異性較好，結果客觀，但是只能針對已知類型。近期有研究者采用數字PCR，利用ALK基因3’端的過表達來鑒定ALK的融合，該方法既具有PCR方法特異性好、結果客觀的優勢，同時又不受融合類型的限制，可以檢測所有融合型，在與三種傳統方法的對比過程中展現出了更好的臨床符合率，未來有望成為一種新的常規檢測手段。

雖然數字PCR的優勢與臨床應用前景已在許多研究中得到確認，但想要進一步在臨床廣泛應用，數字PCR需要針對以下幾個方面進行升級：商用數字PCR系統需要進一步提升樣本檢測通量以充分滿足COVID-19普篩的需求；需要制定國家或行業統一標準；需要產業界進一步降低設備成本；基于數字PCR的**檢測試劑盒需要經過嚴格多中心評價，并獲得NMPA、FDA、CE等監管機構的認證。隨著科研和產業的持續研發和投入，未來數字PCR將在實驗室或醫院得到更多的應用，用于解決科研和臨床問題，提供更準確的診斷結果。數字PCR有望成為下一代分子診斷的**技術。轉基因食品或成分的檢測。

ddPCR主要有Bio-rad公司開發的QX200系統和Rain Drop系統，QX200可以將體系分割成2萬個微滴，Rain Drop可以分割成100萬-1 000萬個微滴。ddPCR原理是通過將一個待分析的PCR反應體系進行微滴化處理，利用微滴發生器制成近20 000個油包水小微滴從而對原始體系進行分割，樣品中的核酸分子隨機分配到大量**的微滴中，每個微滴中含有一個或不含待檢核酸分子。對微滴體系進行擴增反應以后，分析每個微滴的熒光信號，進行有或無的判斷，將判斷結果按照泊松分布的原理，通過讀取靶標和內參核酸的陽性微滴個數以及比例從而得到靶分子的拷貝數及濃度。與芯片式dPCR相比，操作簡單，可以實現高通量的檢測，也保證一定程度上的微滴檢測穩定性。定量方法不依賴于擴增曲線的循環閾值。江蘇重現性數字PCR服務

可以用來驗證二代測序(NGS)。浙江數字PCR數字PCR怎么樣

乳腺*的分型：ER，PR和HER2是乳腺***常用的分子標志物，在患者在開始***之前必須要明確這幾個分子標志物的具體狀態。傳統的檢測方法是通過IHC來確定蛋白的表達情況，而HER2檢測也還可以通過FISH來判斷染色體的擴增情況。盡管相應的檢測都有明確的指南來加以規范，但是在臨床實踐過程之中，有些檢測結果不可避免的還是會受到人為操作和判讀的主觀影響，從而導致同一樣本的結果偏差，為臨床的治療帶來了極大的困惑。有研究者嘗試采用四重數字PCR方法，對這幾個標志物同時進行定量檢測。95例石蠟標本的對比分析結果顯示，HER2，ER和PR與IHC的一致性分別為96.8%，91.5%和85.1%，而ROC曲線下面積則分別為0.991，0.977和0.920，說明該方法與IHC方法有較好的一致性。此外，相比于IHC方法，數字PCR方法還具有操作和判讀標準化、結果重復性好、檢測周期短、標本使用量少等優勢，未來在臨床將會有很好的應用前景。浙江數字PCR數字PCR怎么樣