目前,外泌體研究主要集中在以下幾個方向:開發疾病診斷和預后標志物揭示疾病發病機制作為藥物載體,實現靶向給藥作為疾病***的靶點參與免疫反應調控。外泌體蛋白質組學服務:云生物根據主流外泌體研究策略,開發了一套完整的外泌體蛋白質組學研究技術服務體系。提供從外泌體收集、鑒定到蛋白質組定性定量、數據分析一系列的技術服務項目,確保外泌體研究在同樣技術標準下獲得高質量研究數據。外泌體收集:對于外泌體研究,分離和收**格的外泌體是非常關鍵的一步。目前對于外泌體收集有:超速離心、密度梯度離心、超濾、磁珠免疫、聚合物沉淀與試劑盒提取法等幾種主要方法,各種方法均存在不同優缺點。云生物在現有試劑盒法的基礎上進行大量技術優化,形成了一套針對不同樣品的外泌體提取試劑盒和配套收集方法。可以在提高外泌體收集豐度的同時,***減少雜蛋白殘留,以保證蛋白質組分析階段獲得的數據更加穩定和可靠。 那么外泌體的優勢都有哪些呢?安徽分離外泌體服務
外泌體內包含多種不同分子,如蛋白質、脂質、DNA、mRNA和miRNA,其中miRNA受到**多的關注,由于它們在基因表達調控上有著重要作用。Goldieetal.發現在所有的小RNA中,miRNA在外泌體中所占的比例比它們的來源細胞更高。有證據顯示,miRNA并不是隨機整合入外泌體中的。Guduric-Fuchsetal.分析了許多不同細胞系和它們各自分泌的外泌體中miRNA的表達水平,發現一些miRNA亞群,如miR-150,miR-142-3p,miR-451更偏好于進入外泌體。類似的是,Ohshimaetal.比較了不同*細胞株分泌的外泌體中的let-7miRNAfamilymembers的表達水平,將胃*細胞株AZ-P7a的外泌體與其他細胞株如肺*細胞株SBC-3/DMS-35/NCI-H69,結直腸*細胞株SW480/SW620和胃*細胞株AZ-521的外泌體中的let-7miRNA家族的表達水平。結果是,他們發現let-7miRNA家族在胃*細胞株AZ-P7a分泌的外泌體中較豐富,但是不如其他細胞株中含量多。 安徽分離外泌體服務云生物的外泌體可做WB檢測。
外泌體樣本準備——血漿樣品(不能用肝素抗凝):(1) 用**針和EDTA抗凝管抽取全血,輕柔上下顛倒混勻后室溫或者4°C保存,并在1小時內進行下一步處理;
(2) 4°C條件下,使用吊桶式轉頭1900 g離心10 min,小心吸取上清即為血漿,***500 μl左右丟棄。得到的血漿再次離心,條件為4°C,3000 g,15 min,小心吸出血漿,注意不要碰到底部和側面的沉淀物;
(3) 將血漿凍存于-80°C;干冰運輸。
提示:送樣量**4 ml以上(分離4 ml血漿約需要8-10 ml全血)。
Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:2.那么到底是腦微環境中的哪種細胞,哪種物質介導,致使PTEN丟失呢?作者想想腦內的**細胞周圍無非是:星形膠質細胞,**相關成纖維細胞(CAF),正常成纖維細胞,就把這些細胞分別與**細胞共培養,發現只有與星形膠質細胞共培養后,PTEN的表達明顯下降。接著作者就把星形膠質細胞給干擾掉,把星形膠質細胞內特異性靶向PTEN丟失的microRNA干掉,發現腦轉移的**細胞內的PTEN沒有丟失,瘤體也變小了。得出第二個結論:星形膠質細胞來源的miR-19a沉默了**細胞中的PTEN。 云生物外泌體擁有完善的售后。
體液樣本收集外泌體。抽血技巧:操作要輕柔迅速。試管可翻轉8-10次使樣本與抗凝劑混勻,避免劇烈搖晃。混勻后,將試管固定垂直放置于離心分離器,在頂部記錄抽血的準確時間,因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內是比較穩定的,若時間過長將導致外泌體數量增加。血小板極易因抽血時的物理因素而***并釋放出外泌體,其中包括接觸、壓力、切力。抽血時間:除了血液黏度,體內血液的各項指標在***中變化很大。生理節律會對血小板的***產生很大的影響。白細胞的募集和循環系統中促炎細胞和***細胞會隨時間變化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化。目前尚無設計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化,故應在相同的時間采集樣本。目前飲食是否會對EV產生影響尚未可知,但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環脂蛋白顆粒的類型、數量和作用,故抽血可在***一次用餐后一段確定的時間進行。 您了解外泌體的優勢嗎?安徽分離外泌體服務
血清樣品外泌體怎么制備?安徽分離外泌體服務
UR51102外泌體**培養基。UR52121適用于細胞上清(尿液),可提取400ml細胞上清液。UR52126適用于尿液,可提取500ml尿液。UR52131適用于血清血漿,可提取20ml,應用于蛋白方向CHEM COMMUN-IF=6.2-糖基化-UR52136。UR52136適用于血清血漿,可提取30ml,應用于RNA方向。UR52141適用于提取體液,可提取60mlJ CELL MOL MED-IF=4.7-睪丸損傷-UR52101。UR52111適用于細胞上清液/尿液中外泌體的濃縮J CELL PHYSIOL-IF=4.5-白血病-UR52121。UR90102試劑盒配套純化柱。UR52301適用于外泌體CD63和TSG101蛋白的檢測。UR52302適用于外泌體的標記染色實驗,監測細胞吞噬作用。UR52303適用于外泌體的標記染色實驗,監測細胞吞噬作用。UR21017適用于***成像和示蹤FRONT。UR33101適用于高效裂解外泌體蛋白,也可用于細胞裂解。UR52135適用于血清血漿,可提取5ml,應用于 RNA 方向。UR52130適用于血清或血漿,可提取6m。UR52100適用于細胞上清或者尿液,可提取100ml。UR52101適用于所有樣本CANCER。
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