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來源: 發布時間:2025-07-04

試劑盒成分1預包被板:抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化96T2酶標記抗體:(30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化0.4mLx13標準品:重組小鼠白介素-60.5mLx24EIA緩沖液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS30mLx15標記抗體稀釋液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS12mLx16顯色劑:TMB底物液15mLx17終止液:1N硫酸12mLx18濃縮洗滌液:(40倍濃縮)含1%BSA,0.05%吐溫20BPS50mLx1操作說明1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)酶標儀(450nm)微移液管及其吸嘴量筒及燒杯去離子水冰箱(4°C)坐標紙(log/log)吸水紙試管(用于標準品稀釋)溫育箱(37°C±1°C)洗瓶(用于洗板)一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理,品質科研選擇。四川有什么ELISA試劑盒歡迎選購

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操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。江蘇綜合ELISA試劑盒器材進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理的產品很好。

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底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl(7)ABTS使用液:ABTS0.5mg底物緩沖液(PH5.5)1ml3%H2O22μl(8)抗原、抗體和酶標記抗體。(9)正常人血清和陽性對照血清。器材(1)聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。

ELISA,即酶聯免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),其試劑盒基于抗原-抗體特異性結合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應的抗體或抗原,就會與之特異性結合。然后加入酶標記的二抗或抗原,這種酶標記物能夠與之前結合的物質再次特異性結合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發生顏色反應或化學發光反應等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強度,可以定量或定性地分析樣本中的目標物質。例如在檢測某種疾病相關蛋白時,樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結合,后續的反應步驟逐步放大信號,從而實現對低濃度蛋白的精確檢測。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

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在ELISA試劑盒的研發過程中,酶標記物的選擇至關重要。常見的酶標記物有辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)。HRP具有活性高、穩定性好、底物種類多等優點,其底物如TMB在反應后會產生明顯的顏色變化,便于檢測。ALP也有自身的優勢,例如在某些特定的檢測體系中,ALP標記的抗體可能具有更好的性能。在選擇酶標記物時,需要考慮酶的活性、穩定性、與抗體或抗原的結合效率以及底物的特性等因素。此外,酶標記物的制備方法也會影響其質量,需要采用合適的化學交聯方法將酶與抗體或抗原連接起來,確保連接后的標記物仍然具有良好的活性和特異性。ELISA試劑盒進口品牌有哪一些?在靈敏度、精確度、特異性和產品性價比方面,哪一家更好?上海專注ELISA試劑盒歡迎選購

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ELISA試劑盒的基本原理:ELISA即酶聯免疫吸附測定,ELISA試劑盒是基于這一原理開發的檢測工具。其原理是抗原與抗體的特異性結合:在試劑盒中,固相載體(通常為96微孔板)預先包被有特異性抗體或抗原,當包含有目標抗原或抗體的樣本加入后,會與預包被的物質發生特異性結合;然后加入酶標記的二抗或抗原,再次特異性結合形成復合物;加入底物,酶催化底物發生顯色反應,通過檢測吸光度值來確定祥本中目標物質的含量。這種原理使得ELISA試劑盒具有高度特異性和敏感性,能在復雜的生物樣本如血清、血漿、組織勻漿等中準確檢測微量的目標分子四川有什么ELISA試劑盒歡迎選購

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