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來源: 發布時間:2022-09-13

EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。dU細胞增殖檢測試劑盒找哪家比較安心?上海東寰不錯。江蘇提供EdU細胞增殖檢測試劑盒

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EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進行染色反應液的配制:該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。天津哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒公司EdU細胞增殖檢測試劑盒生產廠家。

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。

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EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。使用EdU細胞增殖檢測試劑盒能給人們帶來便利嗎?河南哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性江蘇提供EdU細胞增殖檢測試劑盒

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