啟動反應與結果分析確認參數無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應結束后,通過軟件查看結果:定量結果:根據標準曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達量(相對定量)。溶解曲線:若出現單一尖銳峰,說明擴增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應條件問題。 污染防控(重點)核酸污染:嚴格分區操作:將試劑配制區、樣本處理區、PCR 擴增區分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實驗臺面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑分裝保存(避免反復凍融),陰性對照(無模板)和空白對照(無菌水)必須設置,以監測是否污染。RePure系列PCR儀能快速找到合適的退火溫度,顯著提高了實驗的成功率和可靠性。江蘇48孔基因擴增儀PCR儀廠家
轉基因作物檢測應用:擴增轉基因作物中的外源基因(如抗蟲基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評估和監管篩查。案例:歐盟法規要求對食品中的轉基因成分進行 PCR 定性檢測。2. 作物育種與品種鑒定應用:利用 SSR(簡單序列重復)、AFLP(擴增片段長度多態性)等分子標記技術,輔助選育抗病、抗逆品種,或鑒定種子純度。案例:通過 PCR 擴增特定品種的特征性 DN**段,區分雜交種與常規種。3. 畜禽疫病檢測應用:檢測動物病原體(如非洲豬瘟病毒、禽流感病毒)的核酸,用于疫病防控和檢疫。無錫32孔基因擴增儀PCR儀經銷商柏恒RePure系列PCR儀在擴增效果上表現出色,能夠準確、可靠地擴增目標DNA序列。
溫度與反應體系控制溫度準確性:定期校準儀器(由專業人員進行),確保變性、退火溫度精細(偏差超過 ±0.5℃會影響結果)。體系一致性:加樣時確保各孔反應體積一致(誤差≤1μL),避免因體積差異導致 Ct 值偏差。避免氣泡:加樣后若有氣泡,需輕輕敲擊板壁或離心去除,否則氣泡會干擾熒光信號采集。3. 試劑與樣本處理酶的保存:qPCR Mix 需 - 20℃冷凍保存,使用時冰上融化,輕輕混勻(勿震蕩,防止酶變性)。模板質量:避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制劑,若樣本濃度過低,可適當增加模板量(但需注意體積占比,避免影響反應體系)。
科研與分子生物學基因表達譜分析應用:通過 RT-PCR 同時檢測多個基因在不同樣本中的表達差異(如**組織芯片研究)。高通量測序文庫制備應用:擴增 DN**段用于二代測序(NGS)建庫,提升測序前處理效率。3. 農業與生物技術轉基因作物批量檢測應用:同時篩查多種作物樣本的外源基因(如抗蟲基因Bt),符合監管機構的高通量檢測需求。畜禽疫病快速篩查應用:批量檢測生豬、禽類的病原體(如非洲豬瘟病毒、禽流感病毒),助力養殖場疫病防控。柏恒RePure系列PCR儀具有優越的擴增效果,可靠地放大目標DNA序列,保證實驗結果的準確性和可重復性。
定性基因擴增儀(PCR 儀)通過對目標 DN**段的特異性擴增,實現對基因的定性檢測(如判斷是否存在特定基因或病原體)。其主要應用場景涵蓋科研、醫療、農業、司法等多個領域,具體如下:1. 基因克隆與功能研究應用:通過 PCR 擴增目的基因片段,插入載體后轉入宿主細胞,用于基因功能驗證、蛋白表達分析等。案例:在**研究中,擴增抑*基因(如TP53)或*基因(如KRAS),分析其突變與**發生的關系。2. 基因表達分析應用:結合逆轉錄 PCR(RT-PCR),檢測 mRNA 的表達水平,研究基因在不同組織、發育階段或處理條件下的差異表達。案例:分析藥物處理后細胞中凋亡相關基因(如Bcl-2、Bax)的表達變化。3. 遺傳變異檢測應用:擴增特定基因區域,檢測單核苷酸多態性(SNP)、插入 / 缺失(Indel)等變異,用于群體遺傳學、進化生物學研究。案例:通過 PCR-RFLP(限制性片段長度多態性)技術分析不同物種的基因多態性。RePure-T三槽儀器采用了多重保護機制,有效防止過熱和其他潛在的故障。江蘇熒光基因擴增儀PCR儀品牌
光學系統可以確保高靈敏度和高特異性,適用于各種基因表達分析、病原體檢測和 SNP 分型等應用。江蘇48孔基因擴增儀PCR儀廠家
微量檢測:PCR 儀具有強大的信號放大能力,能夠將樣本中極其微量的轉基因 DNA 模板進行大量擴增。即使樣本中*含有少量的轉基因成分,經過多輪的 PCR 循環,也能使目標基因片段的數量呈指數級增長,達到可檢測的水平。通??梢詸z測到樣本中低至 pg 級甚至 fg 級的轉基因 DNA,能夠滿足對各種復雜基質中微量轉基因成分的檢測需求。早期監測:這種高靈敏度使得 PCR 儀能夠在轉基因成分含量極低的早期階段就進行有效檢測,對于及時發現和監控轉基因生物的擴散、污染等情況具有重要意義,有助于采取相應的措施進行防控和管理。江蘇48孔基因擴增儀PCR儀廠家