上海楚知生物蛋白純化儀,蛋白純化方法之凝膠過濾色譜:6.洗脫與收集凝膠過濾色譜的緩沖液用單一緩沖液或含鹽緩沖液作為洗脫液即可,主要考慮倆個方面的原因:蛋白的溶解性和穩定性。所用的緩沖液要保證蛋白質樣品在其中不會變性或沉淀,PH應選在樣品較穩定、溶解性良好的范圍之內,同時緩沖液中要含有一定的鹽(NaCL),對蛋白質起穩定和保護作用。洗脫過程中始終保持一定的操作壓,流速不可過高,保持在0.5~3.0mL/min即可。實驗方案設計UniqueAutopure蛋白純化系統Unique CDSystem是一款功能強大、性能先進、高穩定性的色譜數據管理系統。江西全自動蛋白純化儀銷售價格
蛋白純化儀蛋白純化方法之離子交換技術:案例介紹,離子交換是蛋白純化中的重要手段,即可以用于捕獲階段,也可以用于精純階段。預處理和裝柱1.將超純水與沉降膠按1:3比例懸浮,輕輕攪勻;2.將色譜柱固定到設備支架上,鏈接出口管道,從柱底端進口反向泵入超純水,排除管道及篩板中的氣泡,停泵,然后從出口端放出部分超純水,保留1~2cm高度超純水,封死出口端,然后正向沖洗進口端管道和適配器,排除篩板和管道中氣泡;3.通過玻璃棒引流將懸浮膠導入色譜柱,在柱上端補充部分超純水,攪勻,裝上適配器;4.將柱出口端與色譜設備連接,以0.2MPa恒壓裝柱,裝填至恒定的柱床高度,標記柱床膠面位置,關閉泵,松開適配器,降低適配器至膠面下2mm處,繼續裝填,待柱床高度穩定后,標記柱床膠面位置,降低適配器至柱上標記柱床位置下2mm。固定適配器,繼續裝填2~3柱體積;5.確定柱體積,測量柱高,計算柱體積及記錄裝柱時的比較大流速;湖北類似AKTA蛋白純化儀廠家批發價Unique AutoClean系列全自動凝膠凈化系統。
AutoPure 蛋白純化儀系統:產品特點及優勢: – 低脈動高精度雙柱塞輸液泵 ,保證***的分離重現性 ;– 全系統與液體接觸的地方均由生物兼容性材料組成、符合FDA、USP VI等相關法規要求 ;– DAD全譜直讀檢測器,避免了傳統的機械切換式檢測器所帶來的不穩定性及高故障率 ;– 固定波長檢測器燈為長壽命LED等,壽命大于8000小時,降低維護成本 ;– **技術紫外檢測器流通池,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ;– 高靈敏度在線pH、電導率、紫外檢測器,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ;– 集中了buffer選擇閥,自動進樣閥、柱位閥等自動化組件,提高了純化的自動化程度 ;– 具有柱前、柱后、壓差報警,氣泡傳感器檢測等功能,極大的保護了系統及層析柱的安全性 ;
蛋白純化儀,蛋白純化方法之凝膠過濾色譜:4.凝膠柱的填裝凝膠色譜柱與其它色譜方法不同,溶質分子與固定相之間沒有力的作用,樣品組分的分離完全依賴于他們各自的流速差異。裝住時關住柱子下口,在柱內加入約1/3柱床體積的水或緩沖液,然后沿著柱子一側將緩沖液中的凝膠攪拌均勻,緩慢并連續的一次性注入柱內。待凝膠沉積約5厘米左右時,打開柱子下口,控制流速在1ml/min。5.樣品的處理與上樣根據樣品的類型和純化分析,需要選擇合適的緩沖液,為了達到良好的分析效果,上樣量必須保持在較小的體積,一般為柱床體積的1%~5%,蛋白質樣品上樣前應進行濃縮,使樣品濃度不大于4%(樣品濃度與分配系數無關),但需要注意的是,較大分子量的物質,溶液粘度會隨濃度增加而增大,使分子運動受限,影響流速。上樣前,樣品要經濾膜過濾或離心,除去可能堵塞色譜柱的雜質。蛋白純化儀都有哪些配置?
于分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化儀系統的應用領域:分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域分子篩層析也并非一無是處,其應用領域主要包括以下方面:1)脫鹽:高分子(如蛋白質、核酸、多糖等)溶液中的低分子量雜質,可以用分子篩層析除去,這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速,蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易失活,樣品體積可達柱床體積的25%-30%,為了防止蛋白質脫鹽后溶解度降低會形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸銨等揮發性鹽類緩沖液使層析柱平,然后加入樣品,再用同樣緩沖液洗脫,收集的洗脫液用冷凍干燥法除去揮發性鹽類。Unique AutoPrep高壓制備液相色譜的作用。江蘇全自動蛋白純化儀銷售價格
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蛋白純化儀,蛋白純化方法之凝膠過濾色譜:2.凝膠介質的預處理凝膠在使用前應用水充分溶脹(膠:水=1:10),自然溶脹的耗時較長,可采用加熱的方法使溶脹加速,即在沸水浴中將凝膠升溫至沸,1~2h即可達到溶脹。在燒杯中將干燥凝膠加水或緩沖液,攪拌,靜置,傾去上層混懸液,除去上清液中的凝膠碎塊,重復數次,直到上清澄清為止。3.色譜柱的選擇色譜柱的體積和高徑比與色譜分離效果密切相關,凝膠柱床的體積、柱長和柱的直徑以及柱比的選擇必須根據樣品的數量,性質和分離目的進行確定。組別分離時,大多采用2~30cm長的色譜柱,柱床體積為樣品溶液體積的5倍以上,柱比一般在5~10之間;而分級分離一般需要100cm左右的色譜柱,并要求柱床體積大于樣品體積25倍以上,柱比在20~100之間。江西全自動蛋白純化儀銷售價格
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