長期隨訪的觀察時間長期隨訪的持續時間應確保足以觀察到受試者因產品特性、暴露情況（生物分布和給藥途徑）等導致的風險，應不短于遲發性不良反應的預期發生時間。一般而言，針對不同類型的基因zhiliao產品建議如下：?具有基因組整合活性的載體（例如γ-逆轉錄病毒和慢病毒載體）和轉座子元件建議觀察不短于15年。?可以產生持續ganran、或有潛伏再jihuo風險的細菌或病毒載體（如單純皰疹病毒）建議觀察15年或至數據表明不再存在任何風險（ganran或再jihuo）。基因編輯產品建議觀察15年或至數據表明不再存在任何風險。?腺相關病毒載體建議觀察5年或至數據表明不再存在任何風險。種子脫靶檢測，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。江蘇基因療法脫靶檢測guide-sequence

BLESS：利用生物素標簽對DSBs進行原位標記，后經PCR擴增實現對于生物素標記片段的富集，并通過二代測序實現脫靶位點檢測。直接檢測細胞中的切割位點，靈敏度與細胞、組織密切相關。LAM-HTGTS，片段化的gDNA經過LAM-PCR引入接頭，然后進行全基因組易位測序。高通量的全基因組范圍檢測，可準確檢測DSBs引發的重排。GUIDE-Seq，將dsODN    s標簽整合到DSBs位點，通過二代測序檢測這些標簽所在的基因組區域，從而確定脫靶突變的位置。廣使用的細胞內檢測方法。能檢測低頻脫靶突變。Digenome-Seq，片段化的gDNA與CRISPR/RNP混合孵育，進行全基因組測序檢測脫靶。全基因組測序，直接檢測切割位點，能檢測低頻脫靶突變。南京基因編輯脫靶檢測安評內基因編輯技術可能造成的脫靶效應。

先導編輯器：CBE和ABE組合使用可以有效地進行4種堿基轉換（C→T, G→A, A→G, T→C），而無需產生DSB，然而除了這4種堿基轉換，對另外8種堿基轉換（C→A, C→G, G→C, G→T, A→C, A→T, T→A, T→G）以及堿基的插入和缺失，依然缺乏有效的研究工具。先導編輯器（Prime Editor, PE），PE在不依賴DSB和供體DNA的條件下便可有效實現所有12種堿基轉換，此外還能有效實現多堿基的精細插入（較多可插入44bp）和刪除（較多刪除80bp）。> 抗CRISPR蛋白。抗CRISPR（Acr）蛋白是天然的CRISPR/Cas系統抑制劑，由各種可移動遺傳元件（MGEs）編碼，在不同階段抑制CRISPR-Cas的免疫功能。已經發現了多達45個Acr蛋白，其中 "AcrIIA4 "有可能保護細胞免受編輯。Shin和他的同事發現，通過調整AcrIIA4或Cas9加入實驗的時間，AcrIIA4將脫靶修飾減少了4倍，而沒有減少靶向效應。

對于基因修飾細胞zhiliao產品，充分的非臨床研究是為了：（1）闡明基因修飾的目的、功能以及產品的作用機制，明確其在擬定患者人群中使用的生物學合理性；（2）為臨床試驗的給藥途徑、給藥程序、給藥劑量的選擇提供支持性依據；（3）根據潛在風險因素，闡明毒性反應特征，預測人體可能出現的不良反應，確定不良反應的臨床監測指標，為制定臨床風險控制措施提供參考依據。因此，應充分開展非臨床研究，收集用于風險獲益評估的信息，以確立擬開發產品在目標患者人群中預期具有合理的、可接受的獲益風險比，同時為臨床試驗的設計和風險控制策略的制定提供支持性依據。定量脫靶檢測，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。

但是由于CHIP-seq實驗本身的難度較高，DISCOVER-seq這類方法的接受度并不高。3. 其他特殊方法CRISPR技術經過這么多年的發展，其應用已經不局限于造成DNA雙鏈斷裂，一些不要切割DNA雙鏈的CRISPR衍生技術（如堿基編輯、先導編輯和CRISPRi/a），可以在不引發隨機突變的情況下，對基因組進行精細編輯或者調控。這些技術所使用nCas9或dCas9只結合或者切割雙鏈中的一條鏈，之前的脫靶檢測方法都不能直接適用。這些CRISPR衍生技術中，CRISPR產生的脫靶可以被細分為兩個部分，其一是Cas9/sgRNA結合DNA導致的脫靶，這部分信息使用同樣序列的sgRNA進行野生型Cas9脫靶位點檢測能夠間接得到crispr脫靶檢測，推薦唯可生物，實驗實力強，專業性高，檢測效率高，結果準確率高。嘉興種子脫靶檢測企業

值得收藏的CRISPR脫靶檢測方法。江蘇基因療法脫靶檢測guide-sequence

如果基因zhiliao產品通過全身給xingfang式遞送，長期隨訪中的安全性監測不僅包括靶qiguan或靶組織的脫靶活性，而且還應包括可能發生在其他組織和qiguan中的脫靶活性。基因組整合性或者脫靶活性的分析通常需采用有創性12檢測方法取得樣本，實施時還需要考慮技術和倫理上的可行性，例如靶向視網膜或肝臟等組織的基因zhiliao產品，可能難以對靶細胞采樣，這種情況下可能需要通過密切的臨床隨訪等方式間接評估風險；同時，選擇易于采樣的替代細胞也可能提供關于相關信息，例如靶向骨髓造血干細胞的基因zhiliao產品，可以通過采集外周血細胞或富集外周血干細胞進行觀察。江蘇基因療法脫靶檢測guide-sequence