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酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn):為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn),從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株根據(jù)每個(gè)客戶的研究目標(biāo)和內(nèi)容靈活定制研究方案。既能提供建庫服務(wù),也能提供篩庫服務(wù)。陜西發(fā)展酵母文庫
目前,歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫的維護(hù)和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫對水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究,成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫已收錄了1683個(gè)水稻轉(zhuǎn)錄因子,隸屬于54個(gè)家族,覆蓋預(yù)測的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。陜西發(fā)展酵母文庫歐易生物21天極速建庫,一個(gè)文庫可以同時(shí)做單雜、雙雜、三雜,化藥小分子篩選。
水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù):近幾年,中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心王二濤課題組在植物根瘤共生和菌根共生領(lǐng)域取得三項(xiàng)可以寫入教科書級的研究成果。尤其是近兩年,已經(jīng)連續(xù)發(fā)表了Cell、Nature、MP和PNAS等高水平文章。此外,王二濤研究員也是第二屆"科學(xué)探索獎(jiǎng)"的獲得者,肯定他在植物-微生物共生營養(yǎng)交換和菌根共生信號受體發(fā)現(xiàn)方面的貢獻(xiàn)。2021年10月12日,分子植物***中心王二濤研究團(tuán)隊(duì)在Cell上發(fā)表題為“磷信號中樞網(wǎng)絡(luò)調(diào)控菌根共生)”的封面論文。***繪制了水稻-叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),發(fā)現(xiàn)植物直接磷營養(yǎng)吸收途徑(根途徑)和共生磷營養(yǎng)吸收途徑(共生途徑)均是受到植物的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控,回答了菌根共生領(lǐng)域"自我調(diào)節(jié)"這一困擾領(lǐng)域的重要科學(xué)問題。歐易生物CEO肖云平先生也參與了此項(xiàng)研究。文中水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù)由歐易生物提供。
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機(jī)制研究,近日,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文,報(bào)道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機(jī)制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨(dú)特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報(bào)道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。傳統(tǒng)酵母雜交技術(shù)應(yīng)用已經(jīng)30多年,技術(shù)已經(jīng)成熟穩(wěn)定。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個(gè)一組,挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個(gè)陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個(gè)互作子,包含21個(gè)TFs,2個(gè)TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對一驗(yàn)證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢作用元件功能進(jìn)行分析,并對DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。百種酵母文庫,讓您的科研不再困難!!云南酵母文庫使用
液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應(yīng)用。陜西發(fā)展酵母文庫
酵母文庫實(shí)驗(yàn):本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí),MdBT2 可以與一個(gè) DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。陜西發(fā)展酵母文庫
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司致力于醫(yī)藥健康,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求。歐易生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)В瑸榭蛻籼峁└哔|(zhì)量的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢。歐易生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。歐易生物創(chuàng)始人張怡,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠為客戶提供良好的服務(wù)。