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湖南細胞上清外泌體粒徑檢測

來源: 發布時間:2023-01-29

Buller等利用miR-146b的質粒轉染間充質干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內的GBM處。結果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此, Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細胞類型或組織的功能。湖南細胞上清外泌體粒徑檢測

    外泌體是腫瘤細胞與微環境之間相互通訊的重要介質。然而,外泌體在胰腺ai缺氧狀態下調節tumour發展的機制在很大程度上仍然是未知的。巨噬細胞是tumour內和tumour周圍醉豐富的浸潤性免疫相關基質細胞,表現出不同的表型和功能。根據環境因素,巨噬細胞可以被極化為M1或M2型細胞。M1巨噬細胞是以誘導型一氧化dan合酶(iNOS)表達為特征的促炎性巨噬細胞,而M2巨噬細胞表達高水平的抗yan細胞因子(例如IL-10)和有效的精氨酸酶-1(Arg1)活性,有利于腫瘤細胞的生長。然而,巨噬細胞極化的機制在胰腺ai中仍然未知。來自上海第一人民醫院的裘正軍主任在CancerResearch(IF=,中科院一區)發表論文證明胰腺ai細胞來源的外泌體在缺氧微環境中表達miR-301a-3p,并且可以通過PTEN/PI3K信號通路極化巨噬細胞。巨噬細胞的極化導致體外和體內胰腺ai細胞的轉移潛能增強。因此,該研究認為外泌體miR-301a-3p是一種新的介導腫瘤免疫逃避的靶標。 江蘇血清外泌體示蹤外泌體表面具有特定的蛋白標志物,其內含物也極為豐富。

Vlassov等人發表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻中介紹,通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,10000xg離心1h,可將直徑在30-150nm之間,且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,為了進一步純化胎盤相關外泌體,將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,加入非線性蔗糖密度梯度層,10000xg超速離心5h,將分層液采用PEG6000進行2次沉淀。經過多次實驗反復驗證,確定同時表達外泌體標志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層。

現階段,在基于EV的液體活檢和CA研究中,有幾個難以解決的問題,限制了這一領域的發展。例如,如何將微弱的CA相關信號與正常人體生理的背景噪聲區分開來,尤其是在CA早期?如何闡明TME對tumour發展的貢獻,并進一步開發TME相關的診斷和診治策略?通過開發選擇性分離富集技術、全mian鑒定cTME-EVs,為解決上述問題提供了前所未有的機會。劉定斌教授所領導的團隊開發的D-S pHLIP系統突破了從CA相關體液中選擇性富集cTME-EVs的困境,為tumour標志物的發現和EV的溯源提供一種全新的平臺。此外,通過在D-S pHLIP的N端修飾染料或藥物,可用于tumour精細成像和TME靶向藥物遞送,具有巨大的臨床應用價值。中流細胞來源的外泌體能促進中流的轉移。

在運輸DOX的研究中,Wei等選擇了已經在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞,通過化學轉染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結合,使外泌體對DOX的運輸具有靶向性。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內,觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經出現在中流組織處,在注射2h后外泌體的含量高,而未經靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,幾乎很少到達中流組織處,說明對iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性。外泌體是細胞通訊重要的調節者,疾病發生時,外泌體的組成會發生變化,在診斷和zhiliao方面均有重要作用。外泌體Dir

干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經預后,增加血管與神經生成。湖南細胞上清外泌體粒徑檢測

    外泌體的異質性包括:大小異質性、含量異質性、功能異質性和細胞來源異質性。尺寸不等可能是由于MVB界膜內陷不均勻,導致液體和固體的總含量不同,外泌體可能包含由不同大小范圍定義的亞群。大小異質性也會導致不同量的外泌體含量;微環境和細胞固有的生物學可能影響外泌體的含量及其生物學標志物。外泌體可含有膜蛋白、胞質和核dan白、細胞外基質蛋白、代謝產物和核酸,即mRNA、非編碼RNA種類和DNA;外泌體對受體細胞的影響可以不同,因為它們的細胞表面受體表達各不相同,這樣的功能性有不同的表現,1.誘導細胞存活,2.誘導細胞凋亡,3.誘導免疫調節等;異質性也可以基于外泌體的起源organ和組織,包括它們是否來自ai細胞,使它們具有獨特的特性,如對某些organ的趨向性和特定細胞類型的攝取。所有這些特征的組合將有可能引起更高階的復雜性和外泌體的異質性。 湖南細胞上清外泌體粒徑檢測

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